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水稻Rho GDP解离抑制因子OsRhoGDI2基因功能的初步鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略语第8-12页
第一章 引言第12-34页
   ·植物生物技术与转基因植物第12-19页
     ·植物生物技术第12页
     ·植物生物技术在农业上的应用第12-19页
   ·植物中常用的转基因方法第19-26页
     ·农杆菌介导的植物基因转化技术第19-23页
     ·外源DNA 直接转化法第23-26页
   ·转基因植株鉴定方法第26-31页
     ·筛选和鉴定阳性转基因植株第27-28页
     ·外源基因整合情况的鉴定第28-29页
     ·转基因植物外源基因表达检测第29-31页
   ·RNAi 技术在植物基因工程中的应用第31-33页
     ·RNAi 的发现第31页
     ·RNAi 作用机制第31-32页
     ·RNAi 技术的应用第32-33页
   ·立题依据第33-34页
第二章 材料和方法第34-48页
   ·实验材料第34-37页
     ·植物材料第34页
     ·质粒和菌株第34页
     ·酶和试剂第34页
     ·引物设计合成第34-35页
     ·主要仪器设备第35页
     ·常用培养基和缓冲液第35-36页
     ·水稻转化所用培养基第36-37页
   ·实验方法第37-48页
     ·OsRhoGDI2 和OsRacD 基因编码蛋白的生物信息学预测第37-38页
     ·OsRhoGDI2 基因过表达植物载体的构建第38-40页
     ·水稻OsRhoGDI2 基因的RNA 干扰载体构建第40-42页
     ·转化农杆菌第42页
     ·OsRhoGDI2 在洋葱表皮细胞中的定位观察第42-43页
     ·水稻的遗传转化第43-44页
     ·转基因水稻的鉴定第44-45页
     ·OsRhoGDI2 基因转录水平检测第45-47页
     ·过表达转基因水稻结实情况观察第47-48页
第三章 结果第48-62页
   ·OsRhoGDI2 和OsRacD 的理化特性、修饰位点和胞内定位预测第48-51页
     ·OsRhoGDI2 和OsRacD 编码蛋白的理化性质第48-49页
     ·OsRhoGDI2 和OsRacD 编码蛋白的翻译后修饰位点分析第49-50页
     ·OsRhoGDI2 和OsRacD 蛋白亚细胞定位预测第50-51页
   ·pCAMBIA1302-GFP-OsRhoGDI2 载体构建第51-52页
     ·OsRhoGDI2 的cDNA 编码区的扩增、回收和连接第51页
     ·pCAMBIA1302-OsRhoGDI2-GFP 重组载体的鉴定第51-52页
   ·GFP-OsRhoGDI2 融合蛋白的胞内定位检测第52页
   ·OsRhoGDI2 基因的RNA 干扰载体构建第52-56页
     ·干扰片段的扩增和克隆第52-53页
     ·中间载体pKANNIBAL- G 和pKANNIBAL- 2G 的鉴定第53-54页
     ·干扰表达载体pART27- OsRhoGDI2 酶切鉴定第54-56页
   ·农杆菌介导的水稻愈伤组织转化第56-57页
   ·OsRhoGDI2 基因过表达转基因水稻的鉴定第57-58页
   ·OsRhoGDI2 基因在转基因水稻中表达检测第58页
   ·转基因水稻表型观察第58-62页
第四章 讨论第62-66页
   ·OsRhoGDI2 与OsRacD 蛋白的定位和结合特性第62-63页
   ·OsRhoGDI2 与OsRacD 在水稻育性控制中的功能联系第63-66页
第五章 结论第66-68页
参考文献第68-75页
致谢第75-76页
攻读硕士学位期间的研究成果第76-77页

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