油松胚珠雌配子体LCM分离技术的建立及相关RNA的检测
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-26页 |
| ·激光显微切割技术的特点、类型及优化 | 第11-15页 |
| ·激光显微切割技术的特点 | 第11-12页 |
| ·激光显微切割系统的分类 | 第12-13页 |
| ·激光显微切割技术切片方法的选择和优化 | 第13-15页 |
| ·准确识别样品 | 第15页 |
| ·激光显微切割技术在植物学中的的应用 | 第15-18页 |
| ·用激光显微切割技术进行基因表达分析 | 第15-18页 |
| ·激光显微切割技术相关常用试剂盒 | 第18页 |
| ·激光显微切割技术的应用前景 | 第18页 |
| ·油松胚珠发育研究进展 | 第18-25页 |
| ·雌配子体发育的分子调控机制 | 第19-21页 |
| ·胚珠败育的分子调控机制 | 第21-25页 |
| ·油松胚珠败育的类型 | 第21-22页 |
| ·油松胚珠败育的原因 | 第22页 |
| ·可育系与不育系胚珠在组织观察学上的不同 | 第22-23页 |
| ·可育与不育系胚珠蛋白质表达上的不同 | 第23-25页 |
| ·本文研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 2 油松胚珠雌配子体LCM分离技术的建立 | 第26-34页 |
| ·材料与试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·不同的固定方法 | 第26页 |
| ·油松胚珠石蜡切片 | 第26-27页 |
| ·油松胚珠冰冻切片 | 第27页 |
| ·油松胚珠雌配子体的激光显微切割 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-32页 |
| ·不同切片和固定方法的比较 | 第28-30页 |
| ·雌配了体的收集 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·切片方法的选择 | 第32页 |
| ·不同切片厚度对冰冻切片及激光显微切割的影响 | 第32页 |
| ·问题与展望 | 第32-34页 |
| 3. 雌配子体发育相关RNA的检测 | 第34-44页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·试剂盒、引物 | 第34-35页 |
| ·实验仪器 | 第35页 |
| ·实验步骤 | 第35-39页 |
| ·油松胚珠雌配子体微量RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·反转录及扩增 | 第36-37页 |
| ·配制50微升PCR反应体系 | 第37-38页 |
| ·cDNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第38-39页 |
| ·实验结果及讨论 | 第39-44页 |
| ·油松胚珠雌配子体微量RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·PCR及检测 | 第40-44页 |
| 4. 油松胚珠总RNA提取方法及优化 | 第44-51页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试剂盒 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-51页 |
| ·油松胚珠总RNA的提取 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·实验步骤 | 第45-46页 |
| ·油松胚珠总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·1%的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·油松胚珠总RNA提取方法的建立 | 第46-48页 |
| ·总RNA提取方法的优化 | 第48-49页 |
| ·避免RNA酶污染的方法 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 个人简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
