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微核糖核酸簇miR-302-367和miR-106a-363促进iPS细胞生成及其机制

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第1章 绪论—胚胎干细胞、诱导多能干细胞和微核糖核酸第10-28页
   ·胚胎干细胞和诱导多能干细胞第10-22页
     ·胚胎干细胞与干细胞的多能性基因第10-13页
     ·胚胎干细胞自我更新的基态第13-14页
     ·干细胞转录因子调控网络第14-16页
     ·诱导多能干细胞的发现及进展第16-20页
     ·直接重编程的机制和模型解释第20-22页
   ·微核糖核酸第22-28页
     ·微核糖核酸的发现和作用机理第23-24页
     ·微核糖核酸的功能研究方法第24页
     ·微核糖核酸与胚胎干细胞的调控研究第24-26页
     ·胚胎干细胞特异表达的微核糖核酸促进直接重编程第26-27页
     ·本文研究的课题——微核糖核酸簇和重编程的关系第27-28页
第2章 miR-302-367簇和miR-106a-363簇促进重编程第28-70页
   ·材料与方法第29-51页
     ·载体的构建——微核糖核酸表达载体和萤光素酶报告载体第29-32页
     ·微核糖核酸的茎环法定量PCR检测第32-33页
     ·大量提取高纯度质粒DNA的实验室方法第33-35页
     ·细胞培养第35-38页
     ·质粒的磷酸钙法转染和逆转录病毒的收集与感染第38-39页
     ·miRNA的mimics和antagomir的转染第39-40页
     ·直接重编程的详细步骤与效率检测第40-42页
     ·小鼠iPS细胞的建系与多能性鉴定第42-49页
     ·本研究中使用的所有引物的列表第49-51页
     ·统计学分析第51页
   ·实验结果第51-70页
     ·体细胞高表达的微核糖核酸抑制重编程第51-54页
     ·干细胞高表达的微核糖核酸簇的逆转录病毒表达载体的构建第54-60页
     ·微核糖核酸簇302-367和106a-363促进体细胞的重编程第60-65页
     ·由核糖核酸簇促进重编程得到的iPS细胞的多能性鉴定第65-70页
第3章 微核糖核酸簇促进体细胞重编程的机制研究第70-84页
   ·c-Myc转录因子在重编程中可以促进相关miRNA的表达第70-71页
   ·微核糖核酸簇中促进重编程的有效miRNA的确定第71-74页
   ·微核糖核酸簇对重编程中细胞增殖的影响第74页
   ·miR-302-367簇通过加速间充质-上皮细胞转变来促进重编程第74-81页
   ·敲低p53或VPA处理可以联合miR-302-367簇促进重编程第81-82页
   ·miR-303-367簇促进人类细胞的重编程第82-84页
第4章 微核糖核酸直接重编程的探讨第84-88页
   ·其他研究组在miRNA和重编程中的相关结果第84-85页
   ·miR-302-367簇直接重编程小鼠和人类细胞的分析第85-88页
参考文献第88-97页
附录 论文中用到的缩写第97-98页
致谢第98-100页
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第100-101页

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