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两个水稻泛素化相关锌指蛋白及锌转运体蛋白OZT1的功能研究

目录第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一部分 文献综述第12-44页
 第一章 A20/AN1锌指蛋白研究进展第12-22页
  摘要第12页
  Abstract第12-14页
  1 A20/AN1锌指蛋白的发现与结构特征第14-15页
  2 A20/AN1锌指蛋白的功能第15-17页
   ·参与生长发育及免疫反应过程第15-17页
   ·参与非生物胁迫响应第17页
  3 植物A20/AN1锌指蛋白参与非生物胁迫响应的研究第17-19页
  4 植物A20/AN1锌指蛋白参与生长发育及非生物胁迫响应的机制研究第19-21页
   ·通过蛋白互作参与生长发育及非生物胁迫响应第19-20页
   ·通过GA信号途径参与生长发育及非生物胁迫响应第20页
   ·通过泛素结合及E3活性参与生长发育及非生物胁迫响应第20-21页
  5 植物A20/AN1锌指蛋白基因家族研究展望第21-22页
 第二章 泛素-26S蛋白酶体途径及其在植物非生物胁迫中的功能研究第22-44页
  摘要第22页
  Abstract第22-23页
  1 泛素-26S蛋白酶体途径第23-32页
   ·泛素分子特性研究第23-25页
   ·泛素连接级联反应第25-29页
   ·26S蛋白酶体基本结构及功能的研究第29-30页
   ·泛素-26S蛋白酶体途径第30-32页
  2 植物非生物胁迫响应及其调控第32-36页
   ·植物非生物胁迫响应的途径第32-33页
   ·植物非生物胁迫信号的调控第33-36页
  3 UPS在植物非生物胁迫中的功能第36-44页
   ·UPS是非生物胁迫响应所必需的第36-37页
   ·UPS参与激素信号途径第37-41页
   ·UPS参与水分胁迫信号转导第41-42页
   ·UPS参与冷胁迫信号转导第42页
   ·UPS与UV胁迫响应第42-44页
第二部分 研究报告第44-164页
 第三章 水稻A20/AN1型锌指蛋白ZFP177参与泛素-蛋白酶体途径及非生物胁迫响应第44-104页
  摘要第44-45页
  ABSTRACT第45-47页
  1 材料与方法第47-64页
   ·植物材料及处理第47页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成第47页
   ·Quantitative Real-time PCR分析第47-48页
   ·亚细胞定位分析第48-51页
   ·水稻转基因植株的获得及鉴定第51-54页
   ·转基因水稻的耐逆性分析第54页
   ·酵母双杂交筛选互作蛋白第54-59页
   ·ZFP177及其相关突变蛋白的原核表达分析第59-61页
   ·AIP1及AIP2蛋白的原核表达分析第61页
   ·GST Pull Down体外分析蛋白互作第61-62页
   ·HisPull down分析蛋白的体外互作第62页
   ·Western blot验证pull down捕获的互作蛋白第62页
   ·E3泛素连接酶活性分析第62-63页
   ·ZFP177过量表达转基因水稻幼苗蛋白质iTRAQ定量分析第63-64页
  2 结果和分析第64-97页
   ·ZFP177在水稻各个组织中及各种处理下的表达分析第64-66页
   ·ZFP177的亚细胞定位分析第66-67页
   ·ZFP177转基因材料的获得及验证第67-71页
   ·ZFP177过量表达转基因水稻植株的农艺性状考察第71-72页
   ·ZFP177过量表达转基因水稻植株的耐逆性分析第72-74页
   ·酵母双杂交筛选ZFP177互作蛋白第74-79页
   ·ZFP177与泛素互作特性分析第79-85页
   ·ZFP177与AIP4,AIP5互作特性分析第85-87页
   ·ZFP177蛋白E3活性分析第87-89页
   ·ZFPl77过表达转基因水稻幼苗蛋白质iTRAQ定量分析第89-97页
  3 讨论第97-104页
   ·ZFP177为调控蛋白第97-98页
   ·ZFP177及其家族蛋白与泛素互作特性第98-101页
   ·ZFP177及其家族蛋白与泛素-26S蛋白酶体系统的关系第101-102页
   ·ZFP177参与非生物胁迫反应及生长发育第102页
   ·ZFP177参与非生物胁迫及生长发育调控的机制第102-104页
 第四章 水稻A20/AN1型锌指蛋白ZFP181参与生长发育及非生物胁迫响应第104-152页
  摘要第104-105页
  ABSTRACT第105-106页
  1 材料和方法第106-117页
   ·植物材料及处理第106页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成第106页
   ·Quantitative Real-time PCR分析第106-107页
   ·亚细胞定位分析第107-108页
   ·水稻转基因植株的获得及鉴定第108-111页
   ·转基因水稻对外源ABA的敏感性及耐逆性分析第111-113页
   ·转基因水稻内源激素(GA,ABA,IAA)含量测定第113-114页
   ·ZFP181对GA_3及PAC的响应特性分析第114-115页
   ·酵母双杂交筛选互作蛋白第115-116页
   ·ZFP181的原核表达分析第116页
   ·ZFP181的E3泛素连接酶活性分析第116页
   ·ZFP181转基因水稻的转录组分析第116-117页
  2 结果和分析第117-149页
   ·ZFP181在水稻中的组织表达及诱导表达特性分析第117-119页
   ·ZFP181的亚细胞定位分析第119-120页
   ·ZFP181相关转基因水稻植株的获得及验证第120-127页
   ·ZFP181启动子转基因水稻的GUS活性分析第127-129页
   ·ZFP181过量及干涉抑制表达转基因水稻植株的农艺性状考察第129-132页
   ·ZFP181过量及干涉抑制转基因水稻耐逆性分析第132-136页
   ·ZFP181过量及干涉抑制转基因水稻对外源ABA的敏感性分析第136-138页
   ·ZFP181对GA_3及PAC的响应特性分析第138-140页
   ·转基因水稻内源GA,IAA及ABA含量的测定第140-141页
   ·ZFP181过表达转基因水稻的转录组分析第141-144页
   ·ZFP181的E3泛素连接酶活性检测第144-145页
   ·酵母双杂交筛选ZFP181互作蛋白第145-149页
  3 讨论第149-152页
   ·ZFP181为调控蛋白第149页
   ·ZFP181参与非生物胁迫反应及生长发育第149-150页
   ·ZFP181参与非生物胁迫及生长发育调控的机制第150-152页
 第五章 水稻锌转运体OZT1的功能分析第152-164页
  摘要第152页
  Abstract第152-154页
  1 材料和方法第154-156页
   ·菌株与载体第154页
   ·亚细胞定位载体构建及其在酵母细胞中的定位分析第154页
   ·酵母表达载体构建及其在酵母细胞中的表达第154-155页
   ·酵母感受态细胞的制备及醋酸锂法转化第155页
   ·酵母细胞的金属离子胁迫分析第155-156页
  2 结果和分析第156-161页
   ·OZT1亚细胞定位载体构建及其在酵母细胞中的定位分析第156-157页
   ·OZT1酵母表达载体构建及其在酵母细胞中的表达第157-158页
   ·酵母体内分析OZT1对金属离子胁迫的响应第158-161页
  3 讨论第161-164页
全文结论第164-166页
全文创新点第166-168页
附录第168-172页
参考文献第172-192页
攻读博士期间发表的论文第192-194页
致谢第194页

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