提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
第1章 前言 | 第15-33页 |
·人表皮生长因子受体-2(HER2)简介 | 第15-23页 |
·HER2 的生理功能及作用机制 | 第15-17页 |
·HER2 与肿瘤 | 第17-19页 |
·靶向 HER2 的肿瘤治疗研究 | 第19-23页 |
·卵黄抗体简介 | 第23-29页 |
·卵黄抗体的特点 | 第23-24页 |
·卵黄抗体的应用优势 | 第24-27页 |
·卵黄抗体的应用现状 | 第27-29页 |
·IgY 在应用上的局限性 | 第29页 |
·杆状病毒表达系统(BVES)简介 | 第29-33页 |
·BVES 及其原理简介 | 第29-31页 |
·BVES 的优点 | 第31-33页 |
第2章 材料与方法 | 第33-51页 |
·实验材料与仪器 | 第33-35页 |
·实验试剂 | 第33页 |
·引物合成及测序由上海生物工程有限公司完成 | 第33页 |
·菌种及质粒 | 第33页 |
·培养基配制 | 第33-34页 |
·细胞株和实验动物: | 第34页 |
·主要实验设备 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-51页 |
·HER2-ECD 在大肠杆菌中的构建、表达及鉴定 | 第35-43页 |
·rHER2-ECD 特异性卵黄抗体的制备 | 第43-46页 |
·HER2-ECD 在杆状病毒表达系统(BVES)中的表达 | 第46-51页 |
第3章 实验结果 | 第51-71页 |
·rHER2-ECD 在大肠杆菌中的构建、表达及鉴定 | 第51-58页 |
·HER2-ECD 基因的获取、T-A 克隆的构建及其鉴定 | 第51-52页 |
·HER2-ECD 基因亚克隆至 PET-28a 表达载体及其鉴定 | 第52-53页 |
·rHER2-ECD 的诱导表达及鉴定 | 第53-58页 |
·抗 rHER2-ECD 卵黄抗体的制备 | 第58-63页 |
·rHER2-ECD 免疫蛋鸡 | 第58-59页 |
·间接 ELISA 方法检测鸡 H/鸡 B 血清及卵黄中特异性抗体的产生 | 第59-60页 |
·卵黄抗体滴度检测 | 第60-61页 |
·Western Blot 检测 IgY-HER2 是否可识别肿瘤细胞中的HER2 | 第61-63页 |
·HER2-ECD 在杆状病毒表达系统中的表达 | 第63-71页 |
·HER2-ECD 基因的获取及 T-A 克隆的构建 | 第63-64页 |
·HER2-ECD 基因亚克隆至转移载体 pFastBacTM1 中及其鉴定 | 第64-65页 |
·pFastBacTM1-HER2-ECD 转化 DH10Bac 及重组子的筛选 | 第65-66页 |
·重组 Bacmid-HER2-ECD 质粒转染 Sf-9 昆虫细胞 | 第66-69页 |
·SDS-PAGE 分析 rHER2-ECD 的表达情况 | 第69-71页 |
第4章 讨论 | 第71-79页 |
·rHER2-ECD 在大肠杆菌表达量低的原因的探讨 | 第71-72页 |
·纯化的 rHER22-ECD 混有杂蛋白的原因分析 | 第72-73页 |
·蛋白免疫蛋鸡后产生的卵黄抗体滴度不高的原因分析 | 第73-74页 |
·Western blot 检测 rHER2-ECD 特异性卵黄抗体对高表达HER2 的乳腺癌细胞的识别作用时,结果呈多条带显色的原因分析 | 第74-75页 |
·卵黄和血清中的特异性 IgY 的比较 | 第75-76页 |
·rHER2-ECD 在杆状病毒表达系统中表达失败的原因分析 | 第76-79页 |
结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-93页 |