| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第1章 前言 | 第16-44页 |
| ·HIV-1 VIF 蛋白研究概况 | 第16-35页 |
| ·HIV-1 简介 | 第16-19页 |
| ·宿主限制因子及 HIV-1 的辅助蛋白简介 | 第19-21页 |
| ·APOBEC3G 的发现，性质及功能 | 第21-28页 |
| ·APOBEC3G 的发现 | 第21-22页 |
| ·APOBEC3G 的性质 | 第22-24页 |
| ·APOBEC3G 的功能 | 第24-28页 |
| ·HIV-1 Vif 的性质及功能 | 第28-35页 |
| ·Vif 的性质 | 第28页 |
| ·Vif 的功能 | 第28-35页 |
| ·X 射线晶体学简介及 VIF 结构研究现状 | 第35-42页 |
| ·X 射线晶体学简介 | 第35-39页 |
| ·Vif 结构研究现状 | 第39-42页 |
| ·立题依据 | 第42-44页 |
| ·理论依据 | 第42-43页 |
| ·研究目的与实验设计 | 第43-44页 |
| 第2章 VIF-ELONGINB-ELONGINC-CBF-BETA-CULLIN5 E3 复合物结构研究 | 第44-81页 |
| ·材料与方法 | 第44-51页 |
| ·材料与常规试剂 | 第44-46页 |
| ·质粒构建 | 第44-46页 |
| ·抗体 | 第46页 |
| ·仪器与设备 | 第46-47页 |
| ·方法与相关试剂 | 第47-51页 |
| ·大肠杆菌培养与收获 | 第47页 |
| ·蛋白分离纯化 | 第47-49页 |
| ·硒代甲硫氨酸衍生物样品制备及晶体生长 | 第49-50页 |
| ·晶体优化 | 第50页 |
| ·晶体结构测定 | 第50页 |
| ·蛋白静态光散射方法检测蛋白分子量和均匀度 | 第50页 |
| ·蛋白质谱分析 | 第50-51页 |
| ·蛋白浊度检测法 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-78页 |
| ·Vif 蛋白单体的表达，纯化，晶体生长与优化 | 第51-56页 |
| ·MBP-His-Vif 蛋白的构建及表达纯化与晶体生长 | 第56-57页 |
| ·Vif 蛋白单体与抗 HIV 药物的共孵育结晶 | 第57页 |
| ·三元复合物 Vif-EloB-EloC 的构建表达纯化与晶体生长 | 第57-60页 |
| ·VifΔN97-EloBΔC20-EloCΔN17 的表达、纯化与晶体生长 | 第60-63页 |
| ·三元复合物 VifΔN97-EloB-EloCΔN17 的表达、纯化与晶体生长 | 第63-65页 |
| ·VifΔN97-EloB-EloCΔN17 的 tripsin 酶切处理,晶体生长与优化 | 第65-70页 |
| ·VifΔN97-EloB-EloCΔN17 晶体数据采集和结果分析 | 第70-72页 |
| ·VifΔN97-ElonginB-ElonginCΔN17 复合物蛋白的理化性质 | 第72-74页 |
| ·Vif-EloB-EloC-CulN1-159 及 Vif-EloB-EloC-CulN1-230 的构建表达纯化与晶体生长 | 第74-76页 |
| ·Vif-EloB-EloC-CulN11-191 的构建表达纯化与晶体生长 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-79页 |
| ·小结 | 第79-81页 |
| 第3章 VIF 与 ELONGINB-ELONGINC-CBF-β-CULLIN5 E3 复合物中各组分相互作用的研究 | 第81-110页 |
| ·材料与方法 | 第81-87页 |
| ·材料与常规试剂 | 第81-83页 |
| ·质粒构建 | 第81-83页 |
| ·抗体 | 第83页 |
| ·仪器与设备 | 第83-84页 |
| ·方法与相关试剂 | 第84-87页 |
| ·细胞培养及转染 | 第84页 |
| ·免疫印迹(western blot)分法 | 第84-85页 |
| ·蔗糖垫超速离心法 | 第85页 |
| ·RNA 干扰方法及实时定量 PCR 方法 | 第85-86页 |
| ·免疫共沉淀 | 第86页 |
| ·放线菌酮阻抑实验测量蛋白稳定性 | 第86-87页 |
| ·MAGI 法检测子代病毒粒子的感染力 | 第87页 |
| ·结果 | 第87-107页 |
| ·内源 EloB 的表达沉默及其对 Vif-Cul5 E3 复合物功能的影响 | 第87-90页 |
| ·内源 EloB 的表达沉默对 Vif-Cul5 E3 复合物内各组分相互作用的影响 | 第90-93页 |
| ·过表达 EloB 对 Vif 稳定性的影响 | 第93-95页 |
| ·利用共表达可溶性分析 Vif-Cul5 E3 复合物内各组分相互作用 | 第95-98页 |
| ·EloB C 端截短体的构建及其对 Vif-Cul5 E3 复合物功能的影响 | 第98-102页 |
| ·EloB C 端截短体的过表达对 Vif-Cul5 E3 复合物内各组分相互作用的影响 | 第102-104页 |
| ·EloB C 端截短体过表达对 Vif 稳定性的影响 | 第104-106页 |
| ·EloB C 端截短体的作用机理摸索 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-108页 |
| ·小结 | 第108-110页 |
| 结论 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-126页 |
| 作者简历 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
