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细胞自噬及其microRNAs调控分子的筛选与验证

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 绪论第12-16页
   ·本论文研究背景和研究现状第12-14页
   ·研究目的及意义第14-15页
     ·研究目的第14页
     ·理论意义第14-15页
   ·研究内容第15-16页
2 自噬与 microRNAs 之间的相关性联系第16-38页
   ·自噬第16-30页
     ·自噬的发现及概述第16-17页
     ·自噬的分类第17-18页
     ·自噬相关基因 Atg第18-22页
     ·自噬与细胞死亡第22-24页
     ·自噬与信号调控通路第24-26页
     ·自噬的检测方法第26-29页
     ·自噬在病理生理过程中的作用第29-30页
   ·microRNAs第30-37页
     ·microRNAs 的概述第30页
     ·microRNAs 的形成及作用机制第30-32页
     ·microRNAs 的生理病理作用第32-37页
   ·microRNAs 与自噬之间的联系第37-38页
3 自噬模型的建立第38-51页
   ·材料第38-41页
     ·实验细胞第38页
     ·主要试剂第38-39页
     ·主要试剂的配制第39-40页
     ·实验仪器第40-41页
   ·实验方法第41-47页
     ·细胞的复苏、培养及传代第41-42页
     ·雷帕霉素(Rapamycin)诱导细胞的自噬第42页
     ·细胞总蛋白提取第42页
     ·蛋白浓度的测定第42-43页
     ·蛋白印迹法(Western Blotting)检测样品中的蛋白含量第43-44页
     ·GFP-LC3 质粒扩增第44-46页
     ·GFP-LC3 质粒琼脂糖凝胶电泳第46页
     ·GFP-LC3 质粒转染细胞第46-47页
     ·数据统计分析第47页
   ·结果第47-50页
     ·人类乳腺癌细胞 MCF7 自噬模型的建立第47-49页
     ·人类卵巢癌细胞 SKOV-3 自噬模型的建立第49-50页
   ·讨论第50-51页
4 microRNAs 对自噬的影响第51-59页
   ·材料第51-52页
     ·实验细胞第51页
     ·主要试剂第51-52页
     ·主要试剂的配制第52页
     ·实验仪器第52页
   ·实验方法第52-54页
     ·miRNA-142-5p mimics 转染 MCF7 细胞第52页
     ·miRNAs mimics 或 miRNAs inhibitor 转染 SKOV-3 细胞第52-53页
     ·GFP-LC3 质粒和 microRNAs 共转染 SKOV-3 细胞第53页
     ·基于生物信息学软件手段筛选与自噬有关的 microRNAs第53-54页
   ·5 基于本课题组研发的生物信息学方法筛选与卵巢癌自噬有关的microRNAs第54页
     ·数据统计分析第54页
   ·结果第54-57页
     ·miR-142-5p 对 MCF7 细胞 LC3 蛋白表达的影响第54-55页
     ·miRNAs 对自噬的影响第55-57页
   ·讨论第57-59页
5 模拟微重力效应对神经细胞自噬的影响第59-65页
   ·材料第59-60页
     ·实验细胞第59页
     ·主要试剂第59页
     ·主要试剂的配制第59页
     ·实验仪器第59-60页
   ·实验方法第60页
     ·细胞培养第60页
     ·利用回转器模拟微重力第60页
     ·数据统计分析第60页
   ·结果第60-63页
     ·回转对 GFP-LC3 点状聚集物的影响第60-62页
     ·回转对 LC3 蛋白表达的影响第62-63页
   ·讨论第63-65页
6 结论与展望第65-66页
参考文献第66-79页
攻读硕士学位期间所取得的研究成果第79-80页
致谢第80页

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