摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
1 绪论 | 第12-16页 |
·本论文研究背景和研究现状 | 第12-14页 |
·研究目的及意义 | 第14-15页 |
·研究目的 | 第14页 |
·理论意义 | 第14-15页 |
·研究内容 | 第15-16页 |
2 自噬与 microRNAs 之间的相关性联系 | 第16-38页 |
·自噬 | 第16-30页 |
·自噬的发现及概述 | 第16-17页 |
·自噬的分类 | 第17-18页 |
·自噬相关基因 Atg | 第18-22页 |
·自噬与细胞死亡 | 第22-24页 |
·自噬与信号调控通路 | 第24-26页 |
·自噬的检测方法 | 第26-29页 |
·自噬在病理生理过程中的作用 | 第29-30页 |
·microRNAs | 第30-37页 |
·microRNAs 的概述 | 第30页 |
·microRNAs 的形成及作用机制 | 第30-32页 |
·microRNAs 的生理病理作用 | 第32-37页 |
·microRNAs 与自噬之间的联系 | 第37-38页 |
3 自噬模型的建立 | 第38-51页 |
·材料 | 第38-41页 |
·实验细胞 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要试剂的配制 | 第39-40页 |
·实验仪器 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-47页 |
·细胞的复苏、培养及传代 | 第41-42页 |
·雷帕霉素(Rapamycin)诱导细胞的自噬 | 第42页 |
·细胞总蛋白提取 | 第42页 |
·蛋白浓度的测定 | 第42-43页 |
·蛋白印迹法(Western Blotting)检测样品中的蛋白含量 | 第43-44页 |
·GFP-LC3 质粒扩增 | 第44-46页 |
·GFP-LC3 质粒琼脂糖凝胶电泳 | 第46页 |
·GFP-LC3 质粒转染细胞 | 第46-47页 |
·数据统计分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-50页 |
·人类乳腺癌细胞 MCF7 自噬模型的建立 | 第47-49页 |
·人类卵巢癌细胞 SKOV-3 自噬模型的建立 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
4 microRNAs 对自噬的影响 | 第51-59页 |
·材料 | 第51-52页 |
·实验细胞 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51-52页 |
·主要试剂的配制 | 第52页 |
·实验仪器 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-54页 |
·miRNA-142-5p mimics 转染 MCF7 细胞 | 第52页 |
·miRNAs mimics 或 miRNAs inhibitor 转染 SKOV-3 细胞 | 第52-53页 |
·GFP-LC3 质粒和 microRNAs 共转染 SKOV-3 细胞 | 第53页 |
·基于生物信息学软件手段筛选与自噬有关的 microRNAs | 第53-54页 |
·5 基于本课题组研发的生物信息学方法筛选与卵巢癌自噬有关的microRNAs | 第54页 |
·数据统计分析 | 第54页 |
·结果 | 第54-57页 |
·miR-142-5p 对 MCF7 细胞 LC3 蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
·miRNAs 对自噬的影响 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
5 模拟微重力效应对神经细胞自噬的影响 | 第59-65页 |
·材料 | 第59-60页 |
·实验细胞 | 第59页 |
·主要试剂 | 第59页 |
·主要试剂的配制 | 第59页 |
·实验仪器 | 第59-60页 |
·实验方法 | 第60页 |
·细胞培养 | 第60页 |
·利用回转器模拟微重力 | 第60页 |
·数据统计分析 | 第60页 |
·结果 | 第60-63页 |
·回转对 GFP-LC3 点状聚集物的影响 | 第60-62页 |
·回转对 LC3 蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-65页 |
6 结论与展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-79页 |
攻读硕士学位期间所取得的研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |