| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·小麦种子储藏蛋白的组成及分类 | 第11-13页 |
| ·小麦LMW-GS基和醇溶蛋白的染色体定位 | 第13-14页 |
| ·LMW-GS和ω-醇溶蛋白的分子结构及研究现状 | 第14-18页 |
| ·低分子量谷蛋白亚基 | 第14-15页 |
| ·ω-醇溶蛋白 | 第15-18页 |
| ·LMW-GS基因分子标记的开发及研究现状 | 第18-19页 |
| ·LMW-GS和ω-醇溶蛋白与小麦面粉品质(遗传育种)的关系及应用 | 第19-21页 |
| ·小麦谷蛋白转基因研究现状 | 第21-27页 |
| ·HMW-GS转基因小麦研究进展 | 第22-24页 |
| ·LMW-GS转基因小麦研究进展 | 第24-25页 |
| ·醇溶蛋白转基因小麦研究进展 | 第25-27页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 SRL/TRQ-型ω-醇溶蛋白基因亚家族的克隆研究 | 第28-44页 |
| ·材料与方法 | 第28-37页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·ω-醇溶蛋白基因的克隆和测序 | 第28-34页 |
| ·叶片DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·ω-醇溶蛋白基因的基因组PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第30-33页 |
| ·阳性转化子的菌落PCR筛选 | 第33-34页 |
| ·ω-醇溶蛋白基因的序列分析 | 第34页 |
| ·长穗偃麦草籽粒总RNA的提取 | 第34-36页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·RNA反转录及第一链cDNA的合成 | 第36页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36页 |
| ·cDNA中SRL-/TRQ-基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·实验结果 | 第37-42页 |
| ·小麦杂种渐渗系Ⅱ-12及双亲中ω-醇溶蛋白基因分离和序列分析 | 第37-40页 |
| ·ω-醇溶蛋自基因家族的进化分析 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR分析 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 LMW-GS基因Ee34转化小麦研究 | 第44-66页 |
| ·材料与方法 | 第44-55页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·低分子量谷蛋白亚基基因Ee34的克隆 | 第44-45页 |
| ·低分子量谷蛋白亚基Ee34基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·PCR产物的克隆及阳性转化子的菌落PCR筛选 | 第45页 |
| ·植物表达载体p3301-Ubi-Ee344的构建 | 第45-48页 |
| ·相关质粒的提取 | 第45-46页 |
| ·目的片段的制备 | 第46-47页 |
| ·植物表达载体的制备 | 第47页 |
| ·目的片段与载体片段的连接与转化 | 第47页 |
| ·阳性转化子的筛选鉴定 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导的小麦苗端转化 | 第48-50页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第48页 |
| ·质粒转化根癌农杆菌EHA105感受态 | 第48-49页 |
| ·农杆菌苗端转化法转化小麦 | 第49-50页 |
| ·Ee34特异分子引物的设计 | 第50-51页 |
| ·转基因植株的PCR筛选 | 第51-52页 |
| ·T1代转基因小麦籽粒低分子量麦谷蛋白的SDS-PAGE分析 | 第52-55页 |
| ·小麦籽粒麦谷蛋白的提取 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第53-55页 |
| ·结果 | 第55-62页 |
| ·LMW-GS基因Ee34的PCR扩增及植物表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·LMW-GS基因Ee34特异引物的设计 | 第57-59页 |
| ·同源序列比对 | 第57页 |
| ·引物的设计 | 第57-58页 |
| ·特异引物的初步验证 | 第58-59页 |
| ·转化小麦及T0代转基因小麦的特异引物检测 | 第59页 |
| ·转化小麦及T1代转基因小麦的检测 | 第59-61页 |
| ·T1代转基因小麦的GUS阳性检测 | 第60-61页 |
| ·T1代转基因小麦的Ee34特异引物检测 | 第61页 |
| ·T1代转基因小麦籽粒的低分子量麦谷蛋白亚基的SDS-PAGE分析 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-66页 |
| ·农杆菌介导的转化问题 | 第62-63页 |
| ·转基因植物中外源基因的遗传分离和差异性表达分析 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第77页 |
| 硕士期间参加的学术会议 | 第77页 |
| 硕士期间所获奖励 | 第77-78页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第78页 |
