| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| ·甘蔗宿根矮化病的研究 | 第13-15页 |
| ·甘蔗宿根矮化病的发生与危害 | 第13-14页 |
| ·甘蔗宿根矮化病的致病菌及致病机理的研究 | 第14-15页 |
| ·植物病原细菌致病机理 | 第15页 |
| ·病原菌致病因子的调控 | 第15-17页 |
| ·双组分调控系统 | 第15-16页 |
| ·O因子 | 第16-17页 |
| ·群体感应 | 第17页 |
| ·抗O因子研究进展 | 第17-18页 |
| ·本研究工作的目的、意义和技术路线 | 第18-19页 |
| ·本研究工作的目的、意义 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19页 |
| 2 Lxx18460的克隆及序列分析 | 第19-34页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·菌种和质粒 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·酶、试剂和检测设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-27页 |
| ·PCR引物设计 | 第20-21页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第22页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·连接反应 | 第23-24页 |
| ·转化 | 第24页 |
| ·阳性克隆的筛选及测序 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的小量提取 | 第25-26页 |
| ·酶切 | 第26页 |
| ·基因序列分析 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定及酶切分析 | 第28-30页 |
| ·Lxx18460基因的生物信息学分析 | 第30-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 3 Lxx18460基因在感RSD甘蔗品种GT11中的表达 | 第34-44页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·菌种和质粒 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·酶、试剂和检测设备 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·甘蔗叶片总DNA的提取 | 第35页 |
| ·甘蔗RSD致病菌PCR检测 | 第35-36页 |
| ·甘蔗叶片总RNA的提取 | 第36页 |
| ·逆转录 | 第36-37页 |
| ·Lxx18460的PCR扩增 | 第37页 |
| ·Lxx18460的克隆及测序 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计 | 第37页 |
| ·荧光定量PCR检测 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·甘蔗RSD的PCR检测 | 第39-40页 |
| ·Lxx18460CDNA的扩增 | 第40页 |
| ·Lxx18460序列分析 | 第40-41页 |
| ·Lxx18460在感病甘蔗的茎和叶中的表达 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44页 |
| 4 Lxx18460在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定 | 第44-58页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌种和质粒 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·酶、试剂和检测设备 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·pET30a(+)质粒的提取 | 第44-45页 |
| ·双酶切 | 第45页 |
| ·连接反应 | 第45页 |
| ·转化 | 第45-46页 |
| ·酶切验证 | 第46页 |
| ·外源DNA在大肠杆菌中的表达 | 第46页 |
| ·包涵体的确定 | 第46-47页 |
| ·纯化 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第47-48页 |
| ·质谱鉴定 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-58页 |
| ·Lxx18460基因表达载体的构建及重组子的鉴定 | 第48-51页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第51-55页 |
| ·包涵体的确定 | 第55-56页 |
| ·纯化 | 第56-57页 |
| ·质谱结果 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58页 |
| 5 全文结论与讨论 | 第58-62页 |
| ·全文结论 | 第58-59页 |
| ·Lxx18460的克隆及序列分析 | 第58-59页 |
| ·Lxx18460基因在感RSD甘蔗植株中的表达 | 第59页 |
| ·Lxx18460在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定 | 第59页 |
| ·全文讨论 | 第59-61页 |
| ·Lxx18460的生物信息学分析 | 第59-60页 |
| ·Lxx18460在感RSD甘蔗中的表达 | 第60页 |
| ·Lxx18460在大肠杆菌中的表达 | 第60-61页 |
| ·问题与展望 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-81页 |
| 作者在攻读硕士学位期间科研、学术活动和论文发表等情况 | 第81页 |
