小麦抗条锈基因WKS1相关的蛋白组学及重组基因创建
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-24页 |
| ·小麦条锈病 | 第11-14页 |
| ·小条锈病症状 | 第11-12页 |
| ·小麦条锈病原 | 第12页 |
| ·小麦条锈病的侵染过程和地域分布 | 第12-13页 |
| ·小麦抗条锈病基因及种质资源 | 第13-14页 |
| ·小麦条锈病蛋白质组学研究进展 | 第14-21页 |
| ·蛋白质组学的含义 | 第14页 |
| ·蛋白质组学的主要技术 | 第14-19页 |
| ·蛋白质样品制备方法 | 第14-15页 |
| ·蛋白组学相关技术 | 第15-19页 |
| ·小麦锈病蛋白质组学研究进展 | 第19-20页 |
| ·小麦锈病蛋白质组学研究存在的问题和展望 | 第20-21页 |
| ·功能域切换在研究植物抗病基因中的应用 | 第21页 |
| ·利用短柄草模式开展相关研究 | 第21-24页 |
| ·研究目的和意义 | 第24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-36页 |
| ·WKS1 相关的蛋白组学研究 | 第24-28页 |
| ·供试材料 | 第24页 |
| ·条锈菌接种方法 | 第24-25页 |
| ·材料的鉴定 | 第25-26页 |
| ·材料 RNA 的提取 | 第25页 |
| ·材料的表达检测 | 第25-26页 |
| ·叶片蛋白质的提取和聚丙烯酰胺电泳检测 | 第26-27页 |
| ·iTRAQ 技术分析 | 第27-28页 |
| ·麦族 WKS 基因重组体构建 | 第28-36页 |
| ·供试材料 | 第28页 |
| ·WKS 基因的克隆和重组 | 第28-31页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·短柄草转化 | 第32-36页 |
| ·培养基的配制 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第33页 |
| ·农杆菌侵染愈伤组织 | 第33-34页 |
| ·通过筛选得到再生苗 | 第34页 |
| ·转化苗检测 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-57页 |
| ·WKS1 相关差异蛋白质组学研究 | 第36-47页 |
| ·供试材料 WKS1 基因的表达验证和接菌处理 | 第36页 |
| ·蛋白样品的定量和电泳检测 | 第36-37页 |
| ·样品的 iTRAQ 分析 | 第37-39页 |
| ·总蛋白的 GO 分析 | 第37-38页 |
| ·总蛋白的 COG 分析 | 第38-39页 |
| ·不同样品间的差异表达蛋白的数目 | 第39页 |
| ·差异表达蛋白的分析 | 第39-47页 |
| ·麦族 WKS 基因重组体的构建 | 第47-57页 |
| ·WKS 基因的克隆与重组 | 第47-52页 |
| ·WKS 基因的克隆与分析 | 第47-48页 |
| ·Kinase 和 START 片段的扩增 | 第48-49页 |
| ·PCR 产物的酶切处理 | 第49页 |
| ·入门载体的获得 | 第49-50页 |
| ·基因组配和突变回复 | 第50-51页 |
| ·WKS 基因及重组基因转入表达载体 | 第51-52页 |
| ·WKS 基因短柄草转化 | 第52页 |
| ·转基因短柄草检测 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-57页 |
| ·WKS1 相关的蛋白组学 | 第53-55页 |
| ·利用基因切换创建新型 WKS 基因 | 第55-56页 |
| ·利用短柄草模式开展 WKS 基因的抗病性 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
