摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-40页 |
第一部分:叶绿体蛋白转运子的进化起源 | 第11-28页 |
1.前言 | 第11-14页 |
2. | 第14-22页 |
·TOC复合体 | 第14-18页 |
·TOC复合体结合前体蛋白的受体成分 | 第14-17页 |
·TOC复合体的孔道蛋白与蛋白的转运 | 第17-18页 |
·TIC复合体 | 第18-21页 |
·前体蛋白在基质中成熟 | 第21-22页 |
3 拟南芥中同源基因的研究情况 | 第22-25页 |
4 TOC与TIC的进化研究 | 第25-28页 |
第二部分:PPR家族蛋白与光氧化胁迫 | 第28-40页 |
1.PPR家族蛋白简介与其在叶绿体发育中的作用 | 第28-33页 |
2.光氧化化胁迫 | 第33-40页 |
材料与方法 | 第40-64页 |
1、材料 | 第40-43页 |
·植物材料、质粒、菌株 | 第40页 |
·工具酶和试剂 | 第40-41页 |
·抗生素与除草剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41-42页 |
·所用到的数据库与在线分析软件 | 第42-43页 |
2.实验方法 | 第43-64页 |
·植物培养 | 第43页 |
·植物组织DNA的提取 | 第43-45页 |
·PCR | 第45-51页 |
·热击感受态E.coli制备 | 第51-53页 |
·大肠杆菌的转化 | 第53页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第53页 |
·农杆菌的转化 | 第53-54页 |
·克隆载体的鉴定 | 第54页 |
·拟南芥转化 | 第54-55页 |
·质粒DNA的少量制备 碱裂解法 | 第55页 |
·质粒DNA的大量制备 | 第55-56页 |
·连接体系的建立 | 第56页 |
·RNA抽提及反转录 | 第56-58页 |
·树脂切片法 | 第58-59页 |
·透射电镜材料制作 | 第59-60页 |
·叶绿素含量的测定 | 第60-61页 |
·DAB染色与NBT染色 | 第61页 |
·过氧化氢漂白实验 | 第61-62页 |
·Norflurazon处理实验 | 第62页 |
·拟南芥杂交 | 第62页 |
·GUS组织化学染色 | 第62-64页 |
结果与讨论 | 第64-94页 |
第一部分 | 第64-78页 |
概述 | 第64-65页 |
结果 | 第65-76页 |
AtTic21的同源蛋白存在于光合生物中 | 第65-70页 |
SynTic21是AtTic21的结构同源蛋白 | 第70-72页 |
AtTic21基因敲除突变体的获得 | 第72-74页 |
SynTic21是AtTic2l的功能同源蛋白 | 第74-76页 |
讨论 | 第76-78页 |
AtTic21在进化起源上相比其他的膜转运蛋白成分更为保守 | 第76页 |
SynTic21在蓝藻中的同源蛋白可能执行与光合作用相关的功能 | 第76-77页 |
SynTic21蛋白缺少转运肽 | 第77页 |
遗传互补的策略可以用于阐明其他蛋白在进化上的起源 | 第77-78页 |
第二部分 | 第78-94页 |
概述 | 第78页 |
结果 | 第78-91页 |
突变体dpc1的分离与表型分析 | 第78-79页 |
突变体dpc1的光合能力与叶绿体结构观察 | 第79-81页 |
基因DPC1的克隆 | 第81-83页 |
DPC1编码一个PPR家族的叶绿体定位蛋白 | 第83-86页 |
DPC1的表达模式 | 第86页 |
叶绿体编码基因的表达与转录后RNA的编辑 | 第86-88页 |
DPC1对于植物维持拟南芥的光氧化耐受是必需的 | 第88-89页 |
质体向细胞核的逆向信号传导过程在dpc1中没有受到影响 | 第89-91页 |
讨论 | 第91-94页 |
dpc1的表型 | 第91-92页 |
DPC1编码一个羧基端含有SMR结构域的PPR家族的叶绿体蛋白 | 第92页 |
DPC1的功能 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-108页 |
附录 | 第108-112页 |
引物表 | 第108-109页 |
载体图 | 第109-112页 |
发表论文 | 第112-113页 |
致谢 | 第113页 |