摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
中英文对照表 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-19页 |
1 肌肉生长抑制素(MYOSTATIN,MSTN) | 第12-13页 |
·MYOSTATIN 的发现与生物学功能 | 第12页 |
·MYOSTATIN 的分子结构 | 第12-13页 |
2 MSTN 基因的结构、定位和同源性 | 第13-14页 |
·MSTN 基因的结构 | 第13-14页 |
·MSTN 基因的定位 | 第14页 |
·MSTN 基因的同源性 | 第14页 |
3 MSTN 基因的表达特性 | 第14页 |
4 MYOSTATIN 的作用机制 | 第14-16页 |
·MYOSTATIN 与信号转导 | 第15页 |
·MYOSTATIN 对肌细胞的作用 | 第15-16页 |
5 国内外研究进展 | 第16-18页 |
6 前景与展望 | 第18-19页 |
实验一 MSTN 基因的扩增与克隆 | 第19-32页 |
1 实验材料与设备 | 第19-20页 |
·实验材料 | 第19页 |
·实验药品及引物 | 第19页 |
·实验仪器 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-26页 |
·溶液的配制 | 第20页 |
·从肌肉组织中提取总RNA | 第20-21页 |
·反转录合成cDNA | 第21页 |
·MSTN 基因的PCR 扩增 | 第21-22页 |
·胶回收 | 第22-23页 |
·PCDNA3.1 质粒的制备与片段回收 | 第23-24页 |
·目的片段与pcDNA3.1 Vector的重组 | 第24-26页 |
·MSTN-pcDNA3.1 重组质粒测序 | 第26页 |
3 结果 | 第26-30页 |
·总RNA 的提取 | 第26页 |
·MSTN 基因的PCR 扩增 | 第26-27页 |
·MSTN-pMD20-T 的克隆及酶切鉴定 | 第27-28页 |
·pcDNA3.1 质粒的酶切和回收 | 第28页 |
·MSTN-pcDNA3.1 克隆及双酶切鉴 | 第28-29页 |
·测序 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
·RNA 制备 | 第30-31页 |
·MSTN 基因扩增 | 第31页 |
·MSTN 基因序列比对结果及分析 | 第31-32页 |
实验二 MSTN 基因在CHO 细胞中的表达及检测 | 第32-41页 |
1 实验材料与设备 | 第32-33页 |
·实验材料 | 第32页 |
·实验药品 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·溶液及培养基配制 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
·CHO 细胞的复苏 | 第34页 |
·CHO 细胞传代 | 第34页 |
·细胞铺板 | 第34页 |
·脂质体介导转染细胞 | 第34页 |
·MSTN 基因表达水平检测(WESTERN BLOT) | 第34-35页 |
·mRNA 转录水平检测 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-38页 |
·MSTN 蛋白的检测 | 第36-37页 |
·mRNA 转录水平检测 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
·宿主细胞本身对转染效果的影响 | 第38-39页 |
·转染方法对转染效果的影响 | 第39页 |
·携带外源基因的质粒载体对转染效果的影响 | 第39页 |
·铺板细胞对转染效果的影响 | 第39-40页 |
·蛋白表达水平检测 | 第40-41页 |
结论 | 第41页 |
创新 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-48页 |
附录 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51-52页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第52页 |