摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-22页 |
·微生物次级代谢产物是新药的重要来源 | 第10-11页 |
·原核微生物是重要的资源微生物 | 第11-12页 |
·新抗生素筛选 | 第12-16页 |
·各年代新抗生素发现及医用抗生素概况 | 第12-14页 |
·传统抗生素筛选 | 第14-16页 |
·微生物基因组 | 第16-17页 |
·微生物次级代谢产物生物合成基因簇的组成特点 | 第16-17页 |
·次级代谢产物生物合成基因簇资源的定向利用 | 第17页 |
·微生物基因组与新药发现 | 第17页 |
·格尔德霉素、除莠霉素及生物合成途径 | 第17-19页 |
·土壤DNA的提取及纯化 | 第19-21页 |
·土壤DNA的提取 | 第20页 |
·土壤DNA的纯化 | 第20-21页 |
·本课题研究的主要内容 | 第21-22页 |
第2章 从土壤中提取微生物DNA方法的建立 | 第22-26页 |
·实验材料 | 第22页 |
·试剂 | 第22页 |
·仪器 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-23页 |
·土壤的采集和保存 | 第22页 |
·从土壤提取微生物基因组DNA方法比较 | 第22-23页 |
·结果与讨论 | 第23-25页 |
·土壤湿度评估 | 第23-24页 |
·从土壤提取微生物基因组DNA方法比较 | 第24-25页 |
·小结 | 第25-26页 |
第3章 土壤微生物DNA纯化方法的建立 | 第26-34页 |
·实验材料 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·仪器 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·DNA沉淀方法的比较 | 第26-27页 |
·DNA粗提液纯化方法比较 | 第27页 |
·DNA质量和纯度鉴定 | 第27-29页 |
·实验结果与讨论 | 第29-32页 |
·DNA沉淀方法 | 第29页 |
·DNA粗提液纯化方法 | 第29-30页 |
·Hoechst 33258对纯化的土壤DNA定量 | 第30-31页 |
·PCR检验DNA纯度 | 第31-32页 |
·小结 | 第32-34页 |
第4章 筛选方法灵敏性和多样性的检验 | 第34-42页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·试剂 | 第34页 |
·菌种 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·仪器 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-37页 |
·掺菌实验检验筛选方法灵敏性 | 第35-36页 |
·SSCP检验筛选的多样性 | 第36-37页 |
·结果及讨论 | 第37-41页 |
·掺菌实验 | 第37-39页 |
·SSCP | 第39-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第5章 检验整个筛选流程的可行性 | 第42-50页 |
·实验材料 | 第42页 |
·试剂 | 第42页 |
·菌种 | 第42页 |
·培养基 | 第42页 |
·仪器 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-45页 |
·引物设计 | 第42-43页 |
·模拟整个筛选流程 | 第43-45页 |
·随机掺入阳性菌株的土样的筛选 | 第45页 |
·土壤样品筛选 | 第45页 |
·结果及讨论 | 第45-49页 |
·模拟整个筛选流程 | 第45-49页 |
·随机掺入阳性菌株的土样的筛选 | 第49页 |
·土壤样品筛选 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57页 |