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合浦珠母贝钙调素类似蛋白功能的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第1章 引言第12-32页
   ·生物矿化第12-14页
     ·生物矿化的概念第12-13页
     ·生物大分子与生物矿化第13页
     ·研究生物矿化的意义第13-14页
   ·钙调素与钙代谢第14-23页
     ·贝类生物矿化与钙代谢的关系第14-16页
     ·钙调素的结构第16-19页
     ·钙调素的磷酸化现象与功能第19-23页
   ·合浦珠母贝钙调素类似蛋白第23-26页
     ·钙调素类似蛋白与钙调素的序列比较第23-25页
     ·合浦珠母贝钙调素类似蛋白基因在不同组织中的表达分析第25页
     ·合浦珠母贝钙调素类似蛋白与钙调素靶蛋白谱的分析第25-26页
   ·细胞周期调控蛋白p21 与钙调素的相互作用第26-31页
     ·细胞周期及细胞周期正负调控蛋白第26-28页
     ·p21 的结构与性质第28-29页
     ·p21 与钙调素的相互作用及胞内定位第29-31页
   ·研究目的和意义第31页
   ·论文各部分的主要内容第31-32页
第2章 合浦珠母贝钙调素类似蛋白在生物矿化中的作用及其与钙调素的区别第32-60页
   ·前言第32-33页
   ·材料与方法第33-48页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白多克隆抗体的制备与纯化第33-34页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白多克隆抗体的特异性检测第34-36页
     ·贝壳切壳修复过程中钙调素及钙调素类似蛋白的表达分析第36-41页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白对成骨细胞矿化的影响第41-48页
   ·实验结果第48-56页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白多克隆抗体制备纯化与特异性检测第48-49页
     ·壳修复过程中钙调素和钙调素类似蛋白的变化第49-53页
     ·过表达钙调素、钙调素类似蛋白及其缺失突变体对成骨细胞的影响第53-56页
   ·讨论第56-59页
     ·钙调素的定位与功能的关系第56-58页
     ·分泌小泡(SV)与生物矿化的关系第58页
     ·OPN 与生物矿化的关系第58-59页
   ·本章小结第59-60页
第3章 钙调素类似蛋白不同结构域在亚细胞定位中作用的研究第60-75页
   ·前言第60-61页
   ·材料与方法第61-68页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白亚细胞定位的研究第61-63页
     ·钙调素及钙调素类似蛋白绿色荧光蛋白表达载体的构建第63-65页
     ·钙调素类似蛋白各种突变体绿色荧光蛋白表达载体的构建第65-67页
     ·细胞瞬时转染,细胞固定及激光共聚焦观察第67-68页
     ·Western blot 对各表达载体在293T 细胞中亚细胞定位的分析第68页
   ·实验结果第68-73页
     ·钙调素与钙调素类似蛋白在外套膜上皮细胞中的分布第68-69页
     ·钙调素类似蛋白各突变体的cDNA 的克隆第69-70页
     ·钙调素类似蛋白各突变体在293T 细胞中的定位第70-73页
   ·讨论第73-74页
   ·本章小结第74-75页
第4章 钙调素类似蛋白结构域在蛋白相互作用中的研究第75-88页
   ·前言第75-76页
   ·材料与方法第76-82页
     ·p21 红色荧光蛋白表达载体的构建第76-79页
     ·293T 细胞的瞬时共转染第79页
     ·细胞固定及激光共聚焦观察第79页
     ·免疫共沉淀第79-80页
     ·ERK 活性的检测第80-82页
   ·实验结果第82-87页
     ·p21 与合浦珠母贝钙调素和钙调素类似蛋白的相互作用分析第82页
     ·钙调素类似蛋白各结构域与p21 相互作用的分析第82-83页
     ·钙调素类似蛋白C 端球形结构域对ERK 活性影响的分析第83-85页
     ·p21 过表达引起钙调素类似蛋白的核质穿梭第85-87页
   ·讨论第87页
   ·本章小结第87-88页
第5章 p21 引起钙调素类似蛋白核质穿梭机理的研究第88-109页
   ·前言第88-89页
   ·材料与方法第89-98页
     ·生物信息学方法对钙调素类似蛋白磷酸化位点的预测第89-90页
     ·点突变钙调素类似蛋白磷酸化位点对核质穿梭和细胞周期的影响第90-91页
     ·钙调素类似蛋白不同磷酸化状态对蛋白相互作用的影响第91-98页
   ·实验结果第98-105页
     ·Scansite2.0 对钙调素及钙调素类似蛋白磷酸化位点的预测第98-100页
     ·Y139 点突变对钙调素类似蛋白核质穿梭的影响第100-101页
     ·Y139 点突变对细胞周期影响的分析第101-102页
     ·细胞质中钙调素类似蛋白磷酸化状态的分析第102-103页
     ·不同磷酸化状态的钙调素类似蛋白与p21 相互作用的比较第103-105页
     ·钙调素类似蛋白的核质穿梭模式第105页
   ·讨论第105-108页
   ·本章小结第108-109页
第6章 结论第109-111页
参考文献第111-126页
致谢第126-127页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第127页

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