| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·病原学 | 第10-11页 |
| ·病毒基因组结构 | 第11页 |
| ·病毒囊膜基因及受体 | 第11-12页 |
| ·gag基因与p27蛋白 | 第12-13页 |
| ·病毒的致肿瘤能力 | 第13页 |
| ·外源性和内源性病毒 | 第13-15页 |
| ·诊断方法研究进展 | 第15-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| ·研究的目的意义 | 第20页 |
| ·研究的主要内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第3章 材料与方法 | 第22-36页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·病料与细胞 | 第22页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23-24页 |
| ·试剂盒、酶以及DNA、蛋白质Marker | 第24-25页 |
| ·实验所用试剂 | 第25页 |
| ·实验所用细胞培养液、培养基、溶液及配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-36页 |
| ·病毒的培养与分离 | 第27-28页 |
| ·禽白血病病毒CQ01株亚型的分子生物学鉴定 | 第28-29页 |
| ·禽白血病病毒CQ01株gp85基因的克隆与序列分析 | 第29-32页 |
| ·禽白血病病毒p27基因的原核表达 | 第32-36页 |
| 第4章 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·病毒的培养与分离结果 | 第36页 |
| ·病鸡解剖症状和ELISA检测结果 | 第36页 |
| ·细胞收获后ELISA检测结果 | 第36页 |
| ·禽白血病病毒CQ01株亚型的分子生物学鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·禽白血病病毒CQ01株gp85基因的克隆与序列分析 | 第37-40页 |
| ·重组质粒pMD18-T/gp85A/E酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pMD18-T/gp85A/EPCR鉴定结果 | 第38页 |
| ·测序结果和序列分析 | 第38-40页 |
| ·禽白血病病毒p27基因的原核表达 | 第40-46页 |
| ·p27基因RT-PCR扩增结果 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pMD18-T/p27酶切鉴定结果 | 第41页 |
| ·表达载体pET-32a(+)/p27的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·表达载体pET-32a(+)/p27的PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化 | 第43-45页 |
| ·表达产物的Western-blot检测 | 第45-46页 |
| 第5章 讨论 | 第46-52页 |
| ·病毒的培养 | 第46页 |
| ·PCR反应模板的制备 | 第46-47页 |
| ·引物的选择和设计 | 第47页 |
| ·RT-PCR条件的优化 | 第47-48页 |
| ·gp85基因的克隆和序列分析 | 第48页 |
| ·p27基因的原核表达 | 第48-52页 |
| ·表达载体的选择 | 第48-49页 |
| ·表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·表达条件的优化 | 第50-52页 |
| 第6章 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第68页 |
