| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.PAHs污染是全球性环境问题 | 第12-15页 |
| ·PAHs及其来源 | 第12页 |
| ·我国PAHs污染状况 | 第12-14页 |
| ·大气中PAHs污染状况 | 第12页 |
| ·水体中PAHs污染状况 | 第12-13页 |
| ·土壤中PAHs污染状况 | 第13-14页 |
| ·水体沉积物中PAHs污染 | 第14页 |
| ·PAHs对生物的危害 | 第14-15页 |
| 2.生物修复PAHs污染的研究进展 | 第15-16页 |
| 3 拟南芥的研究进展 | 第16-21页 |
| ·模式植物拟南芥 | 第16-17页 |
| ·拟南芥的分子生物学研究策略 | 第17-19页 |
| ·突变技术与拟南芥基因功能的研究 | 第19-21页 |
| 4.本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 PAHs(菲)胁迫下拟南芥功能相关基因的转录变化分析 | 第22-37页 |
| 1.材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·拟南芥生态型及相关的突变体 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验药品 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·拟南芥的种植 | 第23页 |
| ·拟南芥的菲(PAHs)胁迫方法 | 第23页 |
| ·拟南芥总RNA的提取与质量检测 | 第23-26页 |
| ·Trizol法提取RNA | 第23-24页 |
| ·RNA的鉴定 | 第24-26页 |
| ·RNA逆转录生成单链cDNA | 第26页 |
| ·Real time PCR方法与结果数据的分析 | 第26-27页 |
| 2.结果与分析 | 第27-37页 |
| ·RNA质量检测与逆转录为cDNA | 第27-29页 |
| ·RNA完整性检测 | 第27-28页 |
| ·RNA浓度与纯度检测 | 第28页 |
| ·通过PCR手段检测所提取的RNA是否有DNA污染 | 第28-29页 |
| ·在PAHs胁迫下,拟南芥响应胁迫相关基因的转录水平差异分析 | 第29-35页 |
| ·小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 T-DNA插入失活突变体的筛选与PAHs(菲)胁迫实验 | 第37-43页 |
| 1.材料与方法 | 第37-38页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·拟南芥品种 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·T-DNA插入失活突变体纯合体筛选 | 第37页 |
| ·PAHs(菲)胁迫拟南芥的方法 | 第37-38页 |
| 2.结果与分析 | 第38-41页 |
| ·PAHs(菲)胁迫浓度的确定及T-DNA插入失活突变体的相关信息 | 第38页 |
| ·T-DNA插入失活突变体的纯合体筛选 | 第38-39页 |
| ·T-DNA插入失活突变体的PHAs(菲)胁迫实验结果 | 第39-41页 |
| 3.小结与讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 响应PAHs胁迫相关基因拟南芥过表达载体的构建与转化 | 第43-57页 |
| 1.材料与方法 | 第43-47页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·酶 | 第43页 |
| ·Maker | 第43页 |
| ·其他实验试剂 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-47页 |
| ·拟南芥的种植 | 第43-44页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取 | 第44页 |
| ·琼脂糖电泳目的片段的回收 | 第44-45页 |
| ·质粒提取方案: | 第45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第45页 |
| ·DH5a感受态细胞的转化 | 第45-46页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化方案: | 第46页 |
| ·农杆菌转化拟南芥实验方案: | 第46-47页 |
| 2.结果与分析 | 第47-55页 |
| ·基因(At1g18080、At3g16420)过表达载体的构建 | 第47-50页 |
| ·基因At1g18080、At3g16420的T-A克隆 | 第47-50页 |
| ·基因(At1g18080)的T-A克隆 | 第47-49页 |
| ·基因(At3g16420)的T-A克隆 | 第49-50页 |
| ·基因At1g18080、At3g16420过表达载体的构建 | 第50-55页 |
| ·表达载体pFGC5941质粒图谱 | 第50-51页 |
| ·基因At1g18080过表达载体构建 | 第51-52页 |
| ·基因At3g16420过表达载体的构建 | 第52-55页 |
| ·表达载体pFGC5941的改造 | 第52-54页 |
| ·基因At3g16420过表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·基因At1g18080、At3g16420与表达载体pFGC5941重组质粒转化农杆菌 | 第55页 |
| 3.小结与讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 总结与展望 | 第57-59页 |
| 1.总结 | 第57-58页 |
| 2.展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录一 | 第65-71页 |
| 附录二 | 第71-73页 |
| 附录三 | 第73页 |
