| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-14页 |
| ·玉米大斑病及其危害 | 第10页 |
| ·REMI技术及前景展望 | 第10-13页 |
| ·研究的目的及意义 | 第13-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-24页 |
| ·材料 | 第14-16页 |
| ·供试菌株与转化质粒 | 第14页 |
| ·供试培养基 | 第14-15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·溶液的配制 | 第15页 |
| ·主要仪器和设备 | 第15-16页 |
| ·方法 | 第16-24页 |
| ·细菌的转化 | 第16页 |
| ·质粒的提取 | 第16-17页 |
| ·原生质体制备与再生 | 第17-18页 |
| ·REMI转化及转化子潮霉素抗性的稳定性检测与保存 | 第18页 |
| ·突变体的生物学性状观察 | 第18-19页 |
| ·突变菌株致病性鉴定 | 第19-20页 |
| ·突变菌株的分子生物学检测 | 第20-23页 |
| ·突变体的质粒拯救与鉴定 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-35页 |
| ·质粒的提取 | 第24页 |
| ·原生质体的形成 | 第24-25页 |
| ·酶系统以及酶解条件的选择 | 第25-27页 |
| ·酶解浓度对原生质体制备的影响 | 第25-26页 |
| ·制备原生质体的菌体培养条件 | 第26页 |
| ·菌龄对原生质体制备的影响 | 第26页 |
| ·酶解时间及酶解温度对原生质体产量的影响 | 第26-27页 |
| ·转化条件的摸索 | 第27-28页 |
| ·潮霉素B对玉米大斑病菌分生孢子萌发和菌落生长的影响 | 第27-28页 |
| ·不同质粒对玉米大斑病菌转化效率的影响 | 第28页 |
| ·不同质粒浓度对玉米大斑病菌转化效率的影响 | 第28页 |
| ·REMI遗传转化与转化子的获得 | 第28-29页 |
| ·转化子的检测 | 第29-32页 |
| ·突变体插入稳定性检测 | 第29页 |
| ·转化子的致病性检测 | 第29-30页 |
| ·突变体的表型分析 | 第30-31页 |
| ·PCR验证 | 第31-32页 |
| ·Southern杂交 | 第32-33页 |
| ·探针的制备 | 第32页 |
| ·Southern杂交 | 第32-33页 |
| ·典型突变体M142的分析 | 第33-35页 |
| ·菌落生长速度和菌落形态 | 第33-34页 |
| ·转化子孢子形态 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| ·原生质体的获得 | 第35页 |
| ·玉米大斑病菌的REMI诱变 | 第35-36页 |
| ·关于REMI突变体的筛选 | 第36页 |
| ·有待进一步研究的问题 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第43-44页 |
| 作者简历 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 附件 | 第46-48页 |