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日本乙型脑炎病毒E蛋白多表位基因串联表达及免疫效力研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
英文缩略词表第16-18页
第一篇 文献综述第18-63页
 第一章 日本乙型脑炎的研究背景第19-41页
  1 乙脑流行的危害第19-20页
  2 JEV的分类第20-21页
  3 乙脑的流行病学研究第21-22页
   ·乙脑流行的地理分布第21页
   ·乙脑的流行模式第21-22页
  4 乙脑的生物学研究进展第22-27页
   ·病毒的生物学特性第22-23页
   ·病毒的基因组结构第23-26页
   ·乙型脑炎病毒的侵染和复制第26-27页
  5 乙型脑炎病毒的毒力和致病机理第27-28页
  6 乙型脑炎诊断技术研究进展第28-32页
   ·血清学诊断第29-30页
   ·病原学检查第30-32页
  7 乙型脑炎病毒的疫苗研究进展第32-35页
   ·传统疫苗第33页
   ·新型疫苗第33-35页
  8 展望第35-36页
  参考文献第36-41页
 第二章 腺病毒载体概述第41-51页
  1 腺病毒的基本特征第41-43页
  2 腺病毒载体的构建策略第43-45页
  3 互补细胞系第45页
  4 腺病毒载体构造的改进策略第45-48页
   ·去除对非靶器官天然嗜性,提高对靶器官的嗜性第45-46页
   ·构建复制型腺病毒载体第46-47页
   ·建立腺病毒高效重组体系及子代病毒颗粒的大量产生第47-48页
  5 小结第48-49页
  参考文献第49-51页
 第三章 表位疫苗的研究进展第51-63页
  1 表位疫苗研制的理论基础第51-52页
  2 新表位的确定第52-53页
   ·随机肽库技术筛选新表位第52页
   ·借助各种预测手段确定新表位第52-53页
  3 表位肽疫苗设计的优化与修饰第53-54页
   ·"非选择性"辅助T细胞表位的应用第53页
   ·氨基酸间隔序列的应用和侧翼序列的优化第53-54页
   ·T细胞表位和B细胞表位的定位第54页
  4 表位的传递第54-56页
   ·脂肽第54页
   ·多价抗原肽第54-55页
   ·多表位线形肽第55页
   ·受体连接的多肽传递系统第55页
   ·靶向多肽类(targeting polypeptides)第55-56页
  5 应用第56-57页
   ·疟疾第56页
   ·血吸虫病第56-57页
   ·肿瘤第57页
  6 展望第57-59页
  参考文献第59-63页
第二篇 试验研究第63-137页
 第四章 日本脑炎病毒E蛋白多表位基因串联真核质粒的构建第65-77页
  1 材料与方法第66-70页
   ·病毒、细胞及载体第66页
   ·主要试剂、工具酶及仪器第66页
   ·重组真核表达载体的构建第66-68页
   ·质粒的大量提取第68-69页
   ·重组真核质粒的体外表达与鉴定第69-70页
  2 结果第70页
   ·重组质粒的构建第70页
   ·Western-blot分析结果第70页
   ·IFA鉴定结果第70页
  3 讨论第70-74页
  参考文献第74-77页
 第五章 日本脑炎病毒E蛋白多表位基因在大肠杆菌中的融合表达第77-91页
  1 材料和方法第78-84页
   ·材料第78页
   ·方法第78-84页
  2 结果第84页
   ·表达载体pET-rEP的构建第84页
   ·重组载体的酶切鉴定第84页
   ·测序结果第84页
   ·pET-rEP在大肠杆菌中的表达第84页
   ·重组蛋白的纯化及Western blot分析第84页
  3 讨论第84-89页
  参考文献第89-91页
 第六章 多表位DNA疫苗和重组蛋白疫苗对Balb/c小鼠的特异性免疫影响第91-103页
  1 材料和方法第92-95页
   ·材料第92-93页
   ·方法第93-95页
  2. 结果第95-96页
   ·抗体亚型分析第95页
   ·免疫动物中和抗体分析第95页
   ·免疫小鼠T细胞增殖反应检测结果第95页
     ·细胞因子检测第95-96页
  3. 讨论第96-100页
  参考文献第100-103页
 第七章 表达日本乙型脑炎病毒E蛋白多表位基因重组腺病毒的构建第103-117页
  1 材料与方法第104-108页
   ·材料第104页
   ·方法第104-108页
  2 结果第108-110页
   ·转移载体pA5-TEP的构建第108页
   ·同源重组腺病毒质粒pAd5-TEP的线性化鉴定第108页
   ·重组腺病毒的鉴定第108-110页
  3 讨论第110-114页
  参考文献第114-117页
 第八章 重组腺病毒对小鼠特异性免疫的影响第117-126页
  1 材料与方法第118-120页
   ·材料第118页
   ·方法第118-120页
  2 结果第120页
   ·抗体亚型分析第120页
   ·免疫动物中和抗体分析第120页
   ·细胞因子检测第120页
  3 讨论第120-124页
  参考文献第124-126页
 第九章 不同的疫苗联合应用对猪的免疫效力研究第126-137页
  1 材料与方法第127-129页
   ·材料第127-128页
   ·方法第128-129页
  2 结果第129页
   ·免疫动物中和抗体分析第129页
   ·细胞因子检测第129页
  3 讨论第129-134页
  参考文献第134-137页
全文总结第137-139页
致谢第139-141页
攻读学位期间论文发表情况第141页

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