| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1.引言 | 第11-22页 |
| ·植物病原物与寄主相互作 | 第11-13页 |
| ·稻瘟菌致病的分子机制 | 第13-15页 |
| ·与侵染有关的形态分化过程中的信号识别基因 | 第13-14页 |
| ·与毒性相关的无毒基因、毒性决定因子 | 第14-15页 |
| ·与病菌侵入水稻组织后定殖扩展的相关基因 | 第15页 |
| ·分泌蛋白与致病因子 | 第15-16页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第16-22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶家族 | 第16-19页 |
| ·蛋白酶生物学功能 | 第19-21页 |
| ·蛋白质的周转 | 第19页 |
| ·孢子的形成与无性孢子的释放 | 第19页 |
| ·孢子的萌发 | 第19-20页 |
| ·酶等蛋白质的修饰 | 第20页 |
| ·营养的提供 | 第20页 |
| ·基因表达的调控 | 第20-21页 |
| ·病原真菌中丝氨酸蛋白酶的研究进展 | 第21-22页 |
| ·丝氨酸蛋白酶在烟曲霉致病过程中的作用 | 第21页 |
| ·氨酸蛋白酶在新生隐球菌致病过程中的作用 | 第21-22页 |
| 2.稻瘟病菌丝氨酸蛋白酶Subtilases家族蛋白分析 | 第22-29页 |
| ·材料和方法 | 第23-24页 |
| ·蛋白序列获得、及系统演化关系分析 | 第23页 |
| ·蛋白结构域的分析 | 第23-24页 |
| ·结果和与分析 | 第24-28页 |
| ·氨酸蛋白酶家族基因在所分析真菌中的数目及系统演化关系 | 第24-26页 |
| ·稻瘟病菌中丝氨酸蛋白酶家族基因在基因组中分布、序列对比与系统演化关系分析 | 第26-27页 |
| ·稻瘟病菌中丝氨酸蛋白酶家族基因的功能域分析 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-29页 |
| ·关于进化树的构建与分析 | 第28页 |
| ·关于进化树分析与基因功能分析 | 第28页 |
| ·关于稻瘟病菌中的丝氨酸蛋白酶家族基因及其中的MGG_07965.5 | 第28-29页 |
| 3.稻瘟病菌丝氨酸蛋白酶MGSP3(MGG_07965.5)的功能分析 | 第29-56页 |
| ·材料与方法 | 第29-42页 |
| ·供试菌株 | 第29页 |
| ·供试质粒 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·E.coli DH5 α感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第30页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
| ·稻瘟病菌原生质体的制备 | 第31页 |
| ·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证 | 第31-32页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·DNA琼脂糖电泳 | 第33页 |
| ·PCR反应验证 | 第33页 |
| ·蛋白的沉淀 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第34页 |
| ·蛋白质的检测与提取 | 第34页 |
| ·蛋白质的浓缩与活性检测 | 第34-35页 |
| ·质粒酶切与连接 | 第35页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交(DIG) | 第35-40页 |
| ·探针的准备 | 第35-37页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的消化及电泳 | 第37-39页 |
| ·一种或几种限制性内切酶消化适当数量的DNA | 第37-38页 |
| ·DNA变性 | 第38页 |
| ·DNA转膜 | 第38-39页 |
| ·Southern杂交 | 第39-40页 |
| ·免疫显色 | 第40页 |
| ·稻瘟病菌的表型观察 | 第40-42页 |
| ·生长速率测定与菌落颜色 | 第40-41页 |
| ·产孢量测定 | 第41页 |
| ·孢子萌发率的测定 | 第41页 |
| ·附着胞形成率及洋葱表皮侵入实验 | 第41页 |
| ·对植物致病性的测定 | 第41-42页 |
| ·水稻育苗及接种方法 | 第41页 |
| ·调查与记载 | 第41-42页 |
| ·大麦叶片离体接种 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-55页 |
| ·MGSP3过量表达转化子的获得 | 第42-43页 |
| ·MGSP3过量表达转化子的目标蛋白分泌检测 | 第43-44页 |
| ·蛋白MGSP3的大量提取、浓缩及生物学功能的鉴定 | 第44-45页 |
| ·MGSP3敲除质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·MGSP3敲除转化子的筛选与鉴定 | 第47-48页 |
| ·MGSP3过量表达转化子与MGSP3敲除转化子的表型分析 | 第48-52页 |
| ·生长发育的变异 | 第48-51页 |
| ·侵入能力的变异 | 第51-52页 |
| ·MGSP3瞬时表达质粒的构建与MGSP3瞬时表达 | 第52-54页 |
| ·MGSP3敲除转化子的互补质粒的构建及互补转化子的获得 | 第54-55页 |
| ·MGSP3敲除转化子的互补转化子的表型分析 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-56页 |
| ·蛋白提取纯化 | 第55页 |
| ·蛋白质接种水稻叶片 | 第55页 |
| ·基因MGSP3的功能 | 第55-56页 |
| 4.参考文献 | 第56-63页 |
| 5.附录 | 第63-66页 |
| 附录 1 | 第63-65页 |
| 附录 2 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
