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岩青兰黄酮的心肌保护作用及机制研究

中文摘要第1-17页
英文摘要第17-24页
符号说明第24-27页
研究背景第27-33页
第一章 岩青兰黄酮的抗氧化作用研究第33-47页
 摘要第33页
 前言第33-36页
 实验材料第36-37页
  1.岩青兰黄酮第36页
  2.大鼠心肌细胞株第36页
  3.试剂第36-37页
  4.仪器第37页
 实验方法第37-39页
  1.心肌细胞培养第37-38页
  2.MTT法检测细胞活力第38页
   ·细胞加药分组培养第38页
   ·不同浓度岩青兰黄酮预孵育对心肌细胞活力的影响第38页
   ·不同浓度岩青兰黄酮预孵育对阿霉素损伤的心肌细胞活力的影响第38页
  3.不同浓度柚皮素-7-O-葡萄糖苷对阿霉素损伤的心肌细胞活力影响的时效关系研究第38页
  4.柚皮素7-O-葡萄糖苷对心肌细胞SOD,CAT活性,MDA和GSH-Px含量的测定第38-39页
  5.数据处理第39页
 结果第39-44页
  1.光学显微镜观察第39-40页
  2.五种岩青兰黄酮对培养心肌细胞活力的影响第40-41页
   ·不同浓度岩青兰黄酮预孵育对心肌细胞活力的影响第40页
   ·不同浓度岩青兰黄酮预孵育对阿霉素损伤的心肌细胞活力的影响第40-41页
  3.不同浓度柚皮素-7-O-葡萄糖苷对阿霉素损伤的心肌细胞保护作用的时效关系研究第41-42页
  4.柚皮素7-O-葡萄糖苷对心肌细胞SOD、CAT和GSH-Px活性,GSH和MDA含量的影响第42-44页
 讨论第44-46页
 小结第46-47页
第二章 柚皮素7-O-葡萄糖苷对心肌细胞凋亡的保护作用研究第47-66页
 摘要第47页
 前言第47-49页
 实验材料第49-51页
  1.柚皮素-7-O-葡萄糖苷第49页
  2.大鼠心肌细胞及培养第49页
  3.试剂第49-50页
  4.部分试剂配置方法第50-51页
  5.仪器第51页
 实验方法第51-55页
  1.细胞凋亡形态的检测第51-52页
   ·倒置显微镜观察第51页
   ·荧光显微镜观察第51-52页
  2.流式细胞仪分析-磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annxein V法)第52页
  3.琼脂糖凝胶电泳分析第52页
  4.RT-PCR检测心肌细胞Caspase-3,Caspase-9,Bcl-2和HO-1mRNA的表达第52-53页
   ·Trizol提取总RNA第52-53页
   ·RT-PCR第53页
   ·PCR产物分析第53页
  5.Western blot检测Bcl-2,HO-1蛋白表达第53-54页
   ·蛋白抽提及定量第53页
   ·Western blot第53-54页
  6.对细胞内Ca~(2+)的影响第54页
  7.统计学方法第54-55页
 结果第55-62页
  1.细胞凋亡的形态学检测第55-56页
   ·瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞凋亡的形态学变化第55页
   ·荧光染料Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化第55-56页
  2.琼脂糖凝胶电泳分析(DNA ladder)第56-57页
  3.Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测心肌细胞凋亡第57-58页
  4.柚皮素-7-O-葡萄糖苷对阿霉素损伤的心肌细胞Caspase-3,Caspase-9,Bcl-2和HO-1 mRNA表达的影响第58-61页
  5.柚皮素-7-O-葡萄糖苷对阿霉素损伤的心肌细胞Bcl-2和HO-1蛋白表达的影响第61页
  6.柚皮素-7-O-葡萄糖苷对阿霉素损伤的心肌细胞内Ca~(2+)浓度的影响第61-62页
 讨论第62-65页
 小结第65-66页
第三章 柚皮素-7-O-葡萄糖苷对心肌细胞内二相酶的诱导及机理研究第66-77页
 摘要第66页
 前言第66-68页
 实验材料第68-69页
  1.柚皮素-7-O-葡萄糖苷第68页
  2.大鼠心肌细胞及培养第68页
  3.试剂第68-69页
 实验方法第69-70页
  1.RT-PCR检测二相酶NQO1,GCLC,GCLM的mRNA表达第69页
  2.Western blot检测二相酶NQO1的蛋白表达第69页
  3.利用western blot观察对Nrf2核转位和ERK1/2的磷酸化的影响第69-70页
   ·细胞核蛋白抽提及定量第69-70页
   ·Western blot检测对Nrf2核转位和ERK1/2的磷酸化的影响第70页
  4.统计学方法第70页
 结果第70-73页
  1.RT-PCR检测二相酶NQO1,GCLC,GCLM的mRNA表达第70-71页
  2.Western blot检测二相酶NQO1的蛋白表达第71-72页
  3.利用SDS-PAGE and western blot观察对Nrf2核转位和ERK1/2的磷酸化的影响第72-73页
 讨论第73-75页
 小结第75-76页
 总结第76-77页
  1.主要研究结论第76页
  2.主要创新点第76-77页
附录第77-78页
参考文献第78-86页
Review第86-137页
文献综述 食用多酚及生物活性第137-138页
Manuscript No.1第138-161页
Manuscript No.2第161-184页
致谢第184-185页
博士学位期间发表或待发表文章及著作第185-186页
博士学位期间获得或参加的课题第186-187页
学位论文评阅及答辩情况表第187页

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