缩写名词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
1 文献综述 | 第13-33页 |
·棉花纤维发育过程 | 第13-14页 |
·细胞壁与棉花纤维 | 第14-16页 |
·细胞壁的化学组成 | 第14-15页 |
·细胞壁的构架 | 第15-16页 |
·细胞壁的生物合成与装配 | 第16页 |
·植物基因功能研究策略 | 第16-22页 |
·基因功能丧失方法 | 第18-20页 |
·反义抑制和共抑制 | 第18页 |
·插入突变 | 第18-19页 |
·RNA干扰(RNAi) | 第19-20页 |
·基因功能增加方法 | 第20-21页 |
·超量表达(Over expression) | 第20页 |
·基因诱导表达(Inducible expression) | 第20-21页 |
·DNA Microarray | 第21-22页 |
·酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system) | 第22页 |
·棉花纤维发育分子生物学研究进展 | 第22-30页 |
·棉花纤维特异或优势表达基因的克隆 | 第22-23页 |
·棉花纤维发育相关基因的ESTs和表达谱研究 | 第23-25页 |
·棉花纤维优势表达基因的功能验证 | 第25-26页 |
·棉花纤维发育分子机理 | 第26-30页 |
·棉花纤维细胞的分化起始 | 第26-29页 |
·纤维细胞伸长假说 | 第29-30页 |
·激素与棉纤维发育 | 第30-32页 |
·本研究的目的与意义 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-40页 |
·植物材料 | 第33页 |
·RNA和DNA的抽提 | 第33页 |
·独立cDNA文库及均一化cDNA文库的构建 | 第33-35页 |
·DNA MICROARRAY的制作、杂交及数据处理 | 第35-36页 |
·ESTs的分析 | 第36页 |
·NORTHERN及SOUTHERN杂交分析 | 第36-38页 |
·探针标记 | 第36-37页 |
·Northern杂交 | 第37页 |
·Southern杂交 | 第37-38页 |
·超量表达载体的构建 | 第38-39页 |
·RNAI抑制表达载体的构建 | 第39页 |
·启动子的克隆及分析、启动子载体的构建 | 第39页 |
·遗传转化 | 第39页 |
·实时定量PCR(QRT-PCR) | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-75页 |
·纤维发育时期均一化cDNA文库的构建 | 第40-42页 |
·海岛棉PIMA 3-79纤维不同发育时期筛选均一化cDNA文库 | 第42-44页 |
·差异克隆的筛选 | 第42-43页 |
·ESTs的功能分析 | 第43-44页 |
·已测序cDNA的表达分析 | 第44-58页 |
·Type Ⅰ | 第44-45页 |
·Type Ⅱ | 第45页 |
·Type Ⅲ | 第45-52页 |
·Type Ⅳ | 第52-54页 |
·Type Ⅴ | 第54-57页 |
·Type Ⅵ | 第57页 |
·Type Ⅶ | 第57-58页 |
·海岛棉(G.BARBADENSE)与陆地棉(G.HIRSUTUM)表达谱的比较 | 第58-60页 |
·棉花纤维特异或优势表达基因的功能验证 | 第60-68页 |
·部分基因的Southern杂交基因组拷贝数分析 | 第60页 |
·GbEX2和GbEX3的RNAi和超表达分析的设计 | 第60-62页 |
·GbEX2和GbEX3的启动子克隆及其验证载体的构建 | 第62-68页 |
·棉花纤维发育和体细胞胚发生过程中QRT-PCR数据平衡化合适内对照基因的筛选与验证 | 第68-75页 |
4 讨论 | 第75-85页 |
·关于棉花纤维发育CDNA均一化文库的构建 | 第75-77页 |
·海岛棉ESTS的发掘 | 第77页 |
·海岛棉纤维发育的可能机制及海岛棉与陆地棉的基因表达谱的差异 | 第77-79页 |
·关于EXPANSIN的讨论 | 第79-83页 |
·棉花QRT-PCR内对照基因的验证 | 第83页 |
·总结与展望 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-100页 |
PROTOCOLS | 第100-105页 |
附录1 海岛棉纤维发育相关基因的表达谱 | 第105-114页 |
附录2 海岛棉与陆地棉相同发育时期表达谱差异 | 第114-122页 |
附录3 GBEX2和GBEX3启动子可能的反式作用元件 | 第122-132页 |
附录4 简历和博士期间论文发表和投稿情况 | 第132-133页 |
致谢 | 第133页 |