目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1 真菌病毒 | 第9-14页 |
·真菌病毒的发现 | 第9页 |
·真菌病毒的分类 | 第9-10页 |
·真菌病毒的传播 | 第10-11页 |
·真菌病毒与寄主的互作 | 第11-13页 |
·真菌病毒的起源与进化 | 第13-14页 |
2 盾壳霉与盾壳霉RNA病毒(CmRV) | 第14-16页 |
·盾壳霉的研究进展 | 第14-16页 |
·盾壳霉的生物学特性 | 第14-15页 |
·盾壳霉的生态学特性 | 第15-16页 |
·盾壳霉对核盘菌的生物防治 | 第16页 |
·盾壳霉RNA病毒(CmRV)的分子生物学特性 | 第16页 |
3 真菌病毒的反向遗传学研究 | 第16-17页 |
4 研究目的与意义 | 第17-19页 |
·本研究的目的 | 第17页 |
·本研究的意义 | 第17-19页 |
第二章 真菌病毒CmRV全长cDNA表达载体的构建及对盾壳霉ZS-1菌株的转化 | 第19-37页 |
1.材料与方法 | 第19-30页 |
·材料 | 第19-22页 |
·盾壳霉菌株 | 第19页 |
·细菌菌株 | 第19页 |
·引物 | 第19-20页 |
·载体及DNA分子量标记 | 第20页 |
·试剂和培养基 | 第20-21页 |
·酶、试剂盒及其它试剂 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-30页 |
·菌丝的培养与dsRNA的提取 | 第22页 |
·CmRV核酸dsRNA的分离和纯化 | 第22-23页 |
·盾壳霉病毒(CmRV)基因组全长cDNA的克隆 | 第23-25页 |
·利用大肠杆菌转化连接产物 | 第25-27页 |
·CmRV全长cDNA转化载体的构建 | 第27-28页 |
·含重组质粒的农杆菌的制备与培养1.2.6.1农杆菌感受态的制备和热激转化 | 第28-29页 |
·农杆菌介导转化盾壳霉 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-35页 |
·dsRNA的提取和纯化 | 第30页 |
·CmRV基因组序列的确认 | 第30-31页 |
·CmRV全长cDNA序列的克隆 | 第31-35页 |
·全长cDNA亚克隆的构建 | 第31-32页 |
·病毒基因组全长cDNA的获得 | 第32-34页 |
·CmRV全长cDNA转化载体的构建 | 第34-35页 |
·农杆菌介导转化盾壳霉ZS-1 | 第35页 |
3 结论与讨论 | 第35-37页 |
·结论 | 第35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第三章 CmRV全长cDNA转化子生物学特性的研究 | 第37-51页 |
1 材料与方法 | 第37-41页 |
·材料 | 第37-38页 |
·菌株 | 第37页 |
·试剂、培养基和分子标记 | 第37页 |
·引物 | 第37-38页 |
·酶、试剂盒 | 第38页 |
·方法 | 第38-41页 |
·转化子的PCR鉴定 | 第38页 |
·转化子中病毒基因表达的RT-PCR检测 | 第38-39页 |
·转化子dsRNA的电泳检测 | 第39页 |
·转化子生物学特性的研究 | 第39-41页 |
2 结果与分析 | 第41-48页 |
·转化子的PCR验证 | 第41页 |
·转化子中病毒基因表达的RT-PCR检测 | 第41-43页 |
·转化子总RNA的提取 | 第41-42页 |
·病毒基因表达的RT-PCR检测 | 第42-43页 |
·转化子的dsRNA检测 | 第43页 |
·转化子生物学特性的研究 | 第43-48页 |
·转化子生长速度的比较分析 | 第45-46页 |
·转化子产孢能力的比较分析 | 第46-47页 |
·转化子寄生致腐菌核能力的测定结果 | 第47-48页 |
3 结论与讨论 | 第48-51页 |
研究展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61页 |