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草鱼LPL基因克隆及草鱼脂肪细胞提取与培养的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
文献综述第12-33页
 第一章 脂蛋白脂肪酶(LPL)研究进展第12-18页
   ·LPL 概述第12-16页
     ·LPL 结构与合成第12-14页
     ·LPL 基因及其多态性第14-16页
   ·LPL 的生理功能第16-17页
     ·脂蛋白脂酶(LPL)的生理作用第16页
     ·脂蛋白脂酶LPL 在脂质转运途径中的作用第16-17页
   ·LPL 组织特异性表达作用第17-18页
 第二章 脂肪细胞培养、细胞分化的研究进展第18-25页
   ·脂肪细胞起源与脂肪细胞培养第18-19页
   ·脂肪细胞原代培养的技术与方法第19-20页
   ·维持细胞生长所需的最佳条件第20页
   ·脂肪细胞分化第20-25页
     ·脂肪细胞的分化生长第20-25页
 第三章 鱼类细胞培养研究现状及鱼类肥胖基因研究进展第25-33页
   ·鱼类细胞培养起源第25-26页
   ·鱼类细胞的培养方法第26-27页
   ·鱼类脂肪沉积规律及脂肪细胞培养研究进展第27-28页
   ·鱼类细胞培养的应用第28-31页
     ·基础理论研究第28-29页
     ·鱼类毒理学研究方面第29-30页
     ·鱼类肿瘤方面第30页
     ·资源保护方面第30页
     ·活性物质第30-31页
   ·鱼类肥胖基因研究进展第31-33页
实验研究第33-71页
 前言第33-34页
 第四章 草鱼LPL 基因CDNA 的克隆第34-41页
   ·实验材料与方法第34-37页
     ·实验材料第34页
     ·RNA 提取(Trizol 法)第34-35页
     ·反转录(cDNA 合成)第35-36页
     ·PCR 扩增第36页
     ·扩增片段的分离和克隆第36页
     ·克隆产物的鉴定第36-37页
     ·测序结果与已知序列的同源性比较第37页
   ·结果与分析第37-39页
     ·脂肪组织提取RNA 的完整性第37页
     ·重组质粒的PCR 初步鉴定第37页
     ·菌液PCR 鉴定第37-38页
     ·克隆所得序列及同源性比对分析第38-39页
   ·讨论第39-41页
 第五章 草鱼LPL 基因的组织特异性表达第41-47页
   ·实验材料和方法第41-42页
     ·实验材料第41页
     ·实验方法第41页
     ·PCR 扩增第41-42页
     ·凝胶电泳及凝胶成像和定量分析第42页
     ·数据分析第42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·各组织提取的RNA第42-43页
     ·确定反应的循环次数第43页
     ·各组织LPL1、LPL2 及基因的扩增条带第43-44页
     ·各组织LPL 基因mRNA 表达丰度的差异性检验第44-46页
   ·讨论第46-47页
 第六章 草鱼脂肪细胞提取、保存及培养的研究第47-56页
   ·实验材料与方法第48-50页
     ·实验材料第48-49页
     ·实验方法第49-50页
     ·数据处理第50页
   ·实验结果第50-54页
     ·提取条件第50-52页
     ·保存条件第52-53页
     ·脂肪细胞培养第53页
     ·草鱼脂肪细胞组织块培养第53页
     ·培养的草鱼脂肪细胞与大鼠脂肪细胞和猪脂肪细胞进行比较第53-54页
   ·讨论第54-56页
 第七章 草鱼成熟脂肪细胞与草鱼SVF 细胞的差异性研究第56-64页
   ·实验材料与方法第56-58页
     ·实验材料第56-57页
     ·实验方法第57页
     ·数据分析第57-58页
   ·结果与分析第58-63页
     ·草鱼两种细胞提取方法差异第58-59页
     ·草鱼成熟脂肪细胞和草鱼SVF 细胞培养方法异同第59-60页
     ·细胞形态的初步观察及油红O 染色观察第60-61页
     ·LPL 基因在草鱼成熟脂肪细胞和SVF 细胞中表达差异第61-62页
     ·草鱼两种脂肪细胞LPL 基因mRNA 表达丰度的差异性检验第62-63页
   ·讨论第63-64页
 第八章 草鱼脂肪细胞电镜观察(立体结构及超微结构观察)第64-71页
   ·扫描电子显微镜工作原理与应用第64-65页
     ·扫描电子显微镜工作原理第64-65页
     ·扫描电子显微镜应用第65页
   ·透射电子显微镜工作原理与应用第65-67页
     ·透射电子显微镜工作原理第65-66页
     ·透射电子显微镜应用第66-67页
   ·实验材料与方法第67页
   ·实验结果与分析第67-70页
     ·草鱼SVF 细胞及成熟脂肪细胞的扫描电镜观察第67-68页
     ·草鱼SVF 细胞及成熟脂肪细胞的透射电镜观察第68-70页
   ·讨论第70-71页
结论第71-72页
进一步研究思路第72-73页
参考文献第73-80页
附录第80-85页
致谢第85-86页
作者简介第86页

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