摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
第1章 前言 | 第15-37页 |
·持久性有机污染物研究概述 | 第15-22页 |
·POPs研究概述 | 第15-16页 |
·典型POPs-PAHs的概述 | 第16-22页 |
·PAHs的来源与分布及归趋 | 第17-21页 |
·PAHs的累积和生物毒性 | 第21-22页 |
·PAHs微生物降解概述 | 第22-28页 |
·PAHs降解菌的筛选 | 第22-23页 |
·PAHs的微生物代谢途径 | 第23-28页 |
·PAHs的微生物共代谢作用 | 第23-24页 |
·影响PAHs微生物降解的因素 | 第24-25页 |
·菲的细菌代谢途径 | 第25-28页 |
·菲降解细菌的分子生物学研究综述 | 第28-35页 |
·菲的微生物降解酶系及基因簇的研究 | 第28-30页 |
·降解基因的进化 | 第30-31页 |
·功能基因的克隆与表达 | 第31-35页 |
·鞘鞍醇单胞菌属(Sphingomonas)菌株中菲降解相关基因的克隆 | 第31页 |
·Pseudomonas putida OUS82中菲降解相关基因的克隆 | 第31-32页 |
·Pseudomonas putida G7菌中相关降解基因的研究 | 第32页 |
·Pseudomonas putida NCIB9816-4中降解质粒的研究 | 第32页 |
·Nocardioides sp. KP7中菲降解基因的克隆 | 第32-33页 |
·Burkholderia sp. RP007中菲降解基因的克隆 | 第33页 |
·Mycobacterium vanbaalenii sp. PYR-1中菲降解基因的克隆 | 第33-34页 |
·降解基因的表达及调节 | 第34-35页 |
·有毒有机物跨膜研究进展 | 第35-37页 |
第2章 菲降解菌株分离、鉴定及系统发育研究 | 第37-53页 |
·材料与方法 | 第37-42页 |
·试剂和仪器 | 第37-38页 |
·材料与培养基 | 第38页 |
·菲降解菌株分离与降解能力鉴定 | 第38-39页 |
·菲降解菌株的鉴定及系统发育研究 | 第39-42页 |
·结果与讨论 | 第42-52页 |
·分离菌株的菲降解力 | 第42-44页 |
·分离菌株的形态学研究 | 第44-45页 |
·分离菌株的生理生化特征 | 第45-46页 |
·分离菌株的抗生素敏感性 | 第46-47页 |
·分离菌株的全细胞脂肪酸分析 | 第47页 |
·G+Cmol%含量分析 | 第47页 |
·分离菌株的碳源利用能力 | 第47-48页 |
·分离菌株的16SrDNA序列分析 | 第48-49页 |
·基于16SrDNA序列系统发育树的构建 | 第49-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第3章 菲降解菌株生长和降解特性研究 | 第53-63页 |
·材料与方法 | 第53-55页 |
·菲降解菌株生长条件研究 | 第53-54页 |
·分离菌株降解特性研究 | 第54-55页 |
·菲降解率的测定 | 第55页 |
·结果与讨论 | 第55-62页 |
·菲降解菌的生长条件 | 第55-57页 |
·分离菌株的菲降解特性 | 第57-62页 |
·小结 | 第62-63页 |
第4章 菲降解菌对菲降解代谢途径研究 | 第63-74页 |
·材料与方法 | 第63-66页 |
·材料与试剂 | 第63-64页 |
·仪器 | 第64页 |
·降解途径中相关酶活性测定 | 第64-65页 |
·代谢产物制备 | 第65页 |
·代谢产物的鉴定和分析 | 第65-66页 |
·结果与讨论 | 第66-73页 |
·分离菌株的各种酶活测定 | 第66页 |
·全细胞蛋白质电泳 | 第66-67页 |
·降解产物的GC-MS分析 | 第67-71页 |
·两菌株对菲降解途径的推断 | 第71-73页 |
·小结 | 第73-74页 |
第5章 菲降解菌芳香环羟化双加氧酶铁硫蛋白a亚基基因的克隆 | 第74-83页 |
·材料与方法 | 第74-78页 |
·材料 | 第74页 |
·试剂 | 第74-75页 |
·引物设计 | 第75页 |
·基因组DNA提取 | 第75页 |
·PCR扩增 | 第75-76页 |
·PCR产物目的片断的割胶回收 | 第76页 |
·连接 | 第76-77页 |
·感受态细胞的制备与转化 | 第77页 |
·序列测定与系统发育分析 | 第77-78页 |
·结果与讨论 | 第78-82页 |
·PCR扩增产物 | 第78页 |
·阳性克隆子筛选与鉴定 | 第78-79页 |
·目的基因的序列测定与分析 | 第79-81页 |
·系统发育分析 | 第81-82页 |
·小结 | 第82-83页 |
第6章 菲降解菌邻苯二酚2,3-双加氧酶基因的克隆及定位 | 第83-95页 |
·材料与方法 | 第83-87页 |
·材料 | 第83-84页 |
·试剂 | 第84页 |
·引物设计 | 第84页 |
·基因组DNA提取 | 第84页 |
·PCR扩增 | 第84-85页 |
·PCR产物目的片断的割胶回收 | 第85页 |
·连接 | 第85页 |
·感受态细胞的制备与转化 | 第85-86页 |
·序列测定与系统发育分析 | 第86-87页 |
·结果与讨论 | 第87-94页 |
·PCR扩增产物 | 第87页 |
·阳性克隆子筛选与鉴定 | 第87-88页 |
·目的基因的序列测定 | 第88-91页 |
·ZP2菌株的C230基因定位 | 第91-93页 |
·系统发育分析 | 第93-94页 |
·小结 | 第94-95页 |
第7章 ZP2菌株邻苯二酚2,3-双加氧酶基因在大肠杆菌中高效表达 | 第95-102页 |
·材料与方法 | 第95-98页 |
·材料 | 第95页 |
·试剂 | 第95-96页 |
·引物分析 | 第96页 |
·表达质粒的构建与转化 | 第96-97页 |
·目的基因C230在大肠杆菌中诱导表达 | 第97-98页 |
·重组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第98页 |
·表达产物的活性分析 | 第98页 |
·结果与讨论 | 第98-100页 |
·重组表达载体的阳性克隆检测 | 第98-99页 |
·重组表达载体的酶切鉴定结果 | 第99页 |
·C230基因在大肠杆菌中的高效表达 | 第99-100页 |
·表达产物C230酶活检测 | 第100页 |
·小结 | 第100-102页 |
第8章 PAHs菲在模拟细胞膜上的分配 | 第102-115页 |
·材料与方法 | 第102-106页 |
·材料 | 第102-103页 |
·仪器 | 第103页 |
·单层膦脂膜(SPM)的制备 | 第103-104页 |
·SPM表征 | 第104页 |
·标准曲线绘制 | 第104页 |
·SPM分配实验 | 第104-105页 |
·影响因子实验 | 第105页 |
·离子强度的影响实验 | 第105页 |
·pH的影响实验 | 第105页 |
·温度的影响实验 | 第105页 |
·菲在SPM上的反分配实验 | 第105-106页 |
·结果与讨论 | 第106-114页 |
·菲荧光光谱及其测定 | 第106-108页 |
·SPM上菲分配 | 第108-111页 |
·离子强度影响 | 第111页 |
·pH影响 | 第111-112页 |
·温度影响 | 第112-113页 |
·菲在SPM上的反分配 | 第113-114页 |
·小结 | 第114-115页 |
第9章 菲在降解菌ZP1及大肠杆菌细胞膜分配比较 | 第115-122页 |
·材料与方法 | 第115-117页 |
·材料 | 第115页 |
·仪器 | 第115页 |
·细菌的培养 | 第115-116页 |
·细胞膜磷脂的测定 | 第116页 |
·菲在大肠杆菌及降解菌中的分配实验 | 第116-117页 |
·结果与讨论 | 第117-121页 |
·菌体生长曲线 | 第117-118页 |
·菲在细胞膜上的分配 | 第118-121页 |
·小结 | 第121-122页 |
第10章 结论与展望 | 第122-125页 |
致谢 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-140页 |
个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第140-141页 |