| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| ·代谢途径分析 | 第8-12页 |
| ·代谢途径分析介绍 | 第8-10页 |
| ·代谢通量分析 | 第10-12页 |
| ·基本理论 | 第10页 |
| ·代谢通量分析应用 | 第10-12页 |
| ·木糖异构酶及木酮糖激酶的研究 | 第12-20页 |
| ·木糖异构酶（EC 5.3.1.5） | 第12-15页 |
| ·木酮糖激酶（EC2.7.1.17） | 第15-17页 |
| ·xyl基因的结构 | 第17-19页 |
| ·xylAB对重组菌的代谢的影响的研究 | 第19-20页 |
| ·Z.mobilis基因表达调控机制 | 第20页 |
| ·酶活测定的常用技术和方法 | 第20-24页 |
| ·本课题的研究目的及研究内容 | 第24-26页 |
| ·研究目的 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第26-44页 |
| ·实验材料 | 第26-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第26-27页 |
| ·主要设备及仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·蛋白质浓度及含量测定用试剂 | 第29页 |
| ·木糖异构酶酶活测定用试剂 | 第29页 |
| ·木酮糖激酶酶活测定用试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基和补充添加物 | 第30-31页 |
| ·分子生物学操作常用溶液配制 | 第31-32页 |
| ·PCR反应用引物 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-44页 |
| ·菌体培养 | 第33页 |
| ·大肠杆菌的培养 | 第33页 |
| ·Z.mobilis CP4 的培养 | 第33页 |
| ·考马斯亮蓝G-250 染色的方法测定蛋白质浓度 | 第33-35页 |
| ·超声波处理和粗酶液制备 | 第34页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第34-35页 |
| ·木糖异构酶酶活测定 | 第35-36页 |
| ·D-木酮糖标准曲线的测定 | 第35-36页 |
| ·木糖异构酶酶活测定 | 第36页 |
| ·木酮糖激酶酶活测定 | 第36-38页 |
| ·PCR反应 | 第38-39页 |
| ·基因组的提取 | 第38页 |
| ·引物设计与合成 | 第38页 |
| ·反应体系与反应条件 | 第38-39页 |
| ·其它 | 第39页 |
| ·酶切反应 | 第39页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳分析 | 第39-40页 |
| ·目的条带的回收 | 第40页 |
| ·核酸的乙醇沉淀纯化、回收 | 第40页 |
| ·脱磷反应 | 第40页 |
| ·连接反应 | 第40页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·重组质粒大肠杆菌感受态细胞转化与转化子的筛选 | 第41页 |
| ·重组质粒电穿孔转化Z.mobilis CP4 和转化子的筛选 | 第41页 |
| ·酵母基因组DNA提取 | 第41-42页 |
| ·质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·菌落PCR筛选CP4 转化子 | 第43-44页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第44-61页 |
| ·Z. mobilis（运动发酵单胞菌）木糖利用代谢通量分析 | 第44-49页 |
| ·Z.mobilis的生化反应网络 | 第44-45页 |
| ·Z.mobilis的构建代谢通量平衡模型 | 第45-49页 |
| ·代谢通量结果分析 | 第49页 |
| ·pZA22-Pgap-xx的构建 | 第49-59页 |
| ·质粒构建设计 | 第49-51页 |
| ·实验方法与步骤 | 第51-59页 |
| ·载体片段的制备 | 第51-53页 |
| ·E.coli染色体为模板目的片段的克隆及制备 | 第53-55页 |
| ·pBSKS-Pgap-xx-L, pBSKS-Pgap-xx-S的连接与转化 | 第55-57页 |
| ·pZA22-Pgap-xx-L、pZA22-Pgap-xx-S的构建 | 第57-58页 |
| ·CP4(pZA22-Pgap-xx-L、pZA22-Pgap-xx-S)的筛选及鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组菌酶活测定 | 第59-61页 |
| 第四章 结论 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·建议 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录一 代谢通量分析数据引用 | 第70-73页 |
| 附录二 有关质粒及染色体基因的物理图谱 | 第73-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
