铜蓝蛋白的分离纯化及其性质与功能基团研究
| 第一部分 文献综述 | 第1-27页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·铜蓝蛋白的检测方法 | 第13-15页 |
| ·610nm比色法 | 第14页 |
| ·铜含量分析法 | 第14页 |
| ·免疫散射比浊法 | 第14页 |
| ·胺氧化酶活性测定法 | 第14-15页 |
| ·邻联大茴香胺法 | 第15页 |
| ·铜蓝蛋白的分离纯化研究 | 第15-16页 |
| ·铜蓝蛋白的性质研究 | 第16-18页 |
| ·铜蓝蛋白抑制剂的研究 | 第18页 |
| ·铜蓝蛋白的基因 | 第18-20页 |
| ·铜蓝蛋白基因的染色体定位 | 第19页 |
| ·铜蓝蛋白基因的结构 | 第19-20页 |
| ·铜蓝蛋白基因的表达与调控 | 第20页 |
| ·铜蓝蛋白的结构 | 第20-22页 |
| ·铜蓝蛋白的功能 | 第22-24页 |
| ·铜蓝蛋白与发育 | 第22-23页 |
| ·铜蓝蛋白与铁代谢 | 第23-24页 |
| ·铜蓝蛋白的抗氧化作用 | 第24页 |
| ·铜蓝蛋白与疾病 | 第24-25页 |
| ·国内外铜蓝蛋白研究现状 | 第25-27页 |
| 第二部分 引言 | 第27-29页 |
| ·本研究的选题依据 | 第27页 |
| ·本研究的主要内容 | 第27-28页 |
| ·本研究的技术路线 | 第28-29页 |
| 第三部分 铜蓝蛋白的分离纯化及性质研究 | 第29-47页 |
| ·材料与方法 | 第29-36页 |
| ·材料来源 | 第29页 |
| ·主要化学试剂和仪器设备 | 第29-31页 |
| ·主要化学试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-31页 |
| ·酶活性的测定 | 第31页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第31-32页 |
| ·酶的分离纯化 | 第32-33页 |
| ·粗酶液的制备 | 第32-33页 |
| ·DEAE-Sepharose层析 | 第33页 |
| ·羟基磷灰石层析 | 第33页 |
| ·Superdex-200层析 | 第33页 |
| ·铜蓝蛋白纯度鉴定 | 第33-34页 |
| ·酶的理化性质 | 第34-35页 |
| ·CP分子量的测定 | 第34页 |
| ·等电点的测定 | 第34页 |
| ·总糖含量的测定 | 第34页 |
| ·蛋白酶抗性的测定 | 第34-35页 |
| ·酶促动力学研究 | 第35页 |
| ·最适pH值测定 | 第35页 |
| ·pH稳定性测定 | 第35页 |
| ·最适温度测定 | 第35页 |
| ·热稳定性测定 | 第35页 |
| ·酶促反应初速度V_0的测定 | 第35页 |
| ·米氏常数Km及Vmax的测定 | 第35页 |
| ·铜蓝蛋白抑制剂的研究 | 第35-36页 |
| ·部分金属离子对铜蓝蛋白活性的影响 | 第35-36页 |
| ·部分化学试剂对铜蓝蛋白活性的影响 | 第36页 |
| ·抑制剂作用类型的研究 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-47页 |
| ·铜蓝蛋白的分离纯化 | 第36-38页 |
| ·CP的纯度鉴定 | 第38-39页 |
| ·铜蓝蛋白理化性质研究 | 第39-41页 |
| ·CP的分子量和亚基分子量 | 第39-40页 |
| ·等电点测定 | 第40页 |
| ·总糖含量的测定 | 第40页 |
| ·铜蓝蛋白对蛋白酶抗性的研究 | 第40-41页 |
| ·酶促反应动力学研究 | 第41-44页 |
| ·最适pH值及pH稳定性 | 第41-42页 |
| ·最适温度和热稳定性的测定 | 第42-43页 |
| ·酶促反应初速度V_0 | 第43页 |
| ·铜蓝蛋白米氏常数Km及Vmax的测定 | 第43-44页 |
| ·铜蓝蛋白抑制剂的研究 | 第44-47页 |
| ·部分金属离子对铜蓝蛋白活性的影响 | 第44页 |
| ·部分化学试剂对铜蓝蛋白活性的影响 | 第44页 |
| ·抑制剂作用类型研究 | 第44-47页 |
| 第四部分 铜蓝蛋白功能基团的研究 | 第47-53页 |
| ·材料与方法 | 第47-48页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47页 |
| ·试剂的配制 | 第47页 |
| ·酶活测定方法 | 第47页 |
| ·功能基团的修饰 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-53页 |
| ·PCMB对巯基的化学修饰 | 第48-49页 |
| ·PMSF对Ser残基的修饰 | 第49页 |
| ·DTT对二硫键的化学修饰 | 第49-50页 |
| ·NBS对Trp残基的修饰 | 第50页 |
| ·WSC对羧基的修饰 | 第50-51页 |
| ·IAc对His残基的修饰 | 第51页 |
| ·TNBS对Lys残基的修饰 | 第51页 |
| ·乙二醛对Arg残基的修饰 | 第51-53页 |
| 第五部分 讨论 | 第53-58页 |
| ·铜蓝蛋白的分离纯化 | 第53页 |
| ·铜蓝蛋白的理化性质 | 第53-54页 |
| ·铜蓝蛋白的酶学性质 | 第54页 |
| ·铜蓝蛋白的抑制剂 | 第54-55页 |
| ·功能基团的修饰 | 第55-56页 |
| ·展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 主要缩略词表 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
