| 英文缩写词表 | 第1-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-36页 |
| 第一章 Survivin 研究进展 | 第15-25页 |
| 一、Survivin 的结构 | 第15-16页 |
| 二、Survivin 的分布 | 第16-17页 |
| 三、Survivin 与细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 四、Survivin 表达的调节机制 | 第18-19页 |
| 五、Survivin 与血管形成 | 第19-20页 |
| 六、Survivin 与癌基因的关系 | 第20-21页 |
| 七、Survivin 在肿瘤中的应用 | 第21-24页 |
| 八、总结 | 第24-25页 |
| 第二章 RNA 干扰研究进展 | 第25-36页 |
| 一、RNA 干扰现象 | 第25-26页 |
| 二、RNA 干扰作用机制 | 第26-29页 |
| 三、RNAi 的特点 | 第29-30页 |
| 四、siRNA 的制备 | 第30-31页 |
| 五、影响RNAi 效率的因素 | 第31-33页 |
| 六、RNA 干扰技术的应用 | 第33-36页 |
| 第二篇 siRNA survivin表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响 | 第36-66页 |
| 第一章 材料与方法 | 第37-54页 |
| 第一节 实验材料 | 第37-39页 |
| 一、主要仪器 | 第37-38页 |
| 二、主要试剂 | 第38-39页 |
| 三、质粒 | 第39页 |
| 四、抗体 | 第39页 |
| 五、菌株 | 第39页 |
| 六、细胞 | 第39页 |
| 第二节 实验原理及方法 | 第39-53页 |
| 一、pGCsilencerU6/GFP/Survivin siRNA重组质粒的构建 | 第39-43页 |
| 二、细胞培养及重组质粒的转染 | 第43-46页 |
| 三、细胞生长抑制试验-MTT法 | 第46-47页 |
| 四、凋亡细胞的检测 | 第47-48页 |
| 五、Survivin蛋白水平检测—Western 印迹分析 | 第48-51页 |
| 六、Survivin mRNA的RT-PCR检测 | 第51-53页 |
| 第三节 统计学处理 | 第53-54页 |
| 第二章 实验结果 | 第54-66页 |
| 一、成功构建pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA 重组质粒 | 第54-60页 |
| 二、pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA抑制SGC-7901 细胞的生长 | 第60-61页 |
| 三、重组质粒诱导SGC-7901细胞凋亡 | 第61-64页 |
| 1. 流式细胞仪检测到SGC-7901细胞凋亡峰 | 第61-63页 |
| 2. 丫啶橙染色凋亡细胞 | 第63-64页 |
| 四、重组质粒特异性抑制Survivin 在SGC-7901细胞中的表达 | 第64-66页 |
| 1. Survivin 蛋白分析 | 第64-65页 |
| 2. Survivin mRNA分析 | 第65-66页 |
| 第三篇 RNAi 沉默survivin基因对白血病细胞系K562生长的抑制作用 | 第66-74页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第67-69页 |
| 第一节 实验材料 | 第67页 |
| 一、主要仪器 | 第67页 |
| 二、主要试剂 | 第67页 |
| 三、质粒 | 第67页 |
| 四、抗体 | 第67页 |
| 五、菌株 | 第67页 |
| 六、细胞 | 第67页 |
| 第二节 实验方法 | 第67-68页 |
| 一、PGCsilencerU6/GFP/survivinsiRNA 重组质粒的构建与鉴定 | 第67页 |
| 二、细胞培养及重组质粒的转染 | 第67-68页 |
| 三、流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第68页 |
| 四、Survivin 蛋白水平检测—Western 印迹分析 | 第68页 |
| 五、Survivin mRNA的RT-PCR检测 | 第68页 |
| 六、细胞生长抑制试验-MTT法 | 第68页 |
| 第三节 统计学处理 | 第68-69页 |
| 第二章 实验结果 | 第69-74页 |
| 一、pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA转染对K562细胞的生长抑制作用 | 第69-70页 |
| 二、pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA对K562细胞凋亡的影响 | 第70-72页 |
| 三、重组质粒特异性抑制Survivin 在K562 细胞中的表达 | 第72-74页 |
| 1. Survivin 蛋白分析 | 第72-73页 |
| 2. Survivin mRNA分析 | 第73-74页 |
| 第四篇 Survivin 在胃癌组织中的表达及临床意义 | 第74-81页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第75-77页 |
| 第一节 实验材料 | 第75页 |
| 一、实验标本 | 第75页 |
| 二、试剂 | 第75页 |
| 三、主要仪器 | 第75页 |
| 四、细胞 | 第75页 |
| 第二节 实验原理及方法 | 第75-77页 |
| 一、胃癌组织的Survivin 免疫组织化学染色 | 第75-76页 |
| 二、SGC-7901 免疫细胞化学染色 | 第76-77页 |
| 第三节 结果处理及统计 | 第77页 |
| 第二章 实验结果 | 第77-81页 |
| 一、随访 | 第77页 |
| 二、阳性片的判定 | 第77-79页 |
| 三、Survivin 表达与预后的关系 | 第79-81页 |
| 第五篇 讨论 | 第81-88页 |
| 第六篇 结论 | 第88-91页 |
| 参考文献 | 第91-104页 |
| 中文摘要 | 第104-109页 |
| 英文摘要 | 第109-114页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第114-115页 |
| 致 谢 | 第115页 |
