以木聚糖酶基因为标记构建枯草芽孢杆菌高效表达系统
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·枯草芽胞杆菌表达系统 | 第10-14页 |
| ·枯草芽胞杆菌简介 | 第10页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统概述 | 第10-11页 |
| ·枯草芽胞杆菌表达系统的特点 | 第11-12页 |
| ·枯草芽胞杆菌表达系统的载体 | 第12-14页 |
| ·芽胞杆菌整合载体研究进展 | 第14-17页 |
| ·整合载体与整合机理 | 第14-15页 |
| ·同源重组的方式 | 第15-16页 |
| ·整合载体的整合位点 | 第16-17页 |
| ·枯草芽胞杆菌的分泌表达系统 | 第17-18页 |
| ·S-层 | 第18-19页 |
| ·S-层简介 | 第18页 |
| ·S-层蛋白启动子 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶 | 第19-27页 |
| ·木聚糖及木聚糖酶的结构 | 第19-20页 |
| ·木聚糖酶的分子生物学 | 第20-25页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第25-27页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-37页 |
| ·材料 | 第28-32页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·主要的酶和试剂 | 第28-29页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第29-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·抗生素用量(终浓度)及培养温度 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·枯草芽胞杆菌总DNA的提取 | 第33页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·DNA片断的回收 | 第34页 |
| ·DNA的转化 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌转化子的质粒快检方法 | 第35页 |
| ·淀粉酶水解实验 | 第35页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第35页 |
| ·SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·基因工程菌的培养 | 第36页 |
| ·木聚糖酶活的测定 | 第36-37页 |
| ·木聚糖酶的酶学性质分析 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-47页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆和重组基因的构建 | 第37-38页 |
| ·重组菌整合载体的构建 | 第38-40页 |
| ·重组菌的构建 | 第40-41页 |
| ·重组木聚糖酶的表达 | 第41-43页 |
| ·木糖标准曲线的绘制 | 第42页 |
| ·重组木聚糖酶的活性测定 | 第42-43页 |
| ·重组菌B1702木聚糖酶性质的研究 | 第43-45页 |
| ·重组菌B1702木聚糖酶作用的最适PH | 第43-44页 |
| ·重组菌B1702木聚糖酶作用的最适温度 | 第44页 |
| ·重组菌B1702木聚糖酶的热稳定性 | 第44-45页 |
| ·培养基对木聚糖酶活的影响 | 第45-47页 |
| ·不同碳源对木聚糖酶活的影响 | 第45-46页 |
| ·不同氮源对木聚糖酶活的影响 | 第46页 |
| ·不同添加物对木聚糖酶活的影响 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| ·xynA基因的克隆 | 第49页 |
| ·在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第49页 |
| ·重组菌的木聚糖酶性质研究 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 发表论文 | 第56页 |
