| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-7页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 一、本论文的研究背景和立题依据 | 第7页 |
| 二、本论文的研究内容和意义 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| 一、组蛋白的乙酰化和去乙酰化与基因表达调控 | 第8-10页 |
| (一) 组蛋白乙酰化与基因表达调控 | 第8页 |
| (二) HAT 和 HDAC | 第8-9页 |
| (三) CoA 和 CoR | 第9页 |
| (四) HDAC 和 HAT 在癌症发病机制的作用及其对癌症治疗的启迪 | 第9-10页 |
| 二、组蛋白去乙酰化酶 | 第10-15页 |
| (一) 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第10-11页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶的生物学功能 | 第11-15页 |
| 1. 组蛋白去乙酰化酶(HDAC)和转录辅抑制子 | 第11-12页 |
| 2. 组蛋白去乙酰化酶相关蛋白 | 第12-13页 |
| 3. Sirtuins 蛋白复合物及其生物学功能 | 第13-14页 |
| 4. 组蛋白去乙酰化酶与癌症 | 第14-15页 |
| 三、组蛋白去乙酰化酶抑制剂的作用机制及分类 | 第15-17页 |
| (一) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂的作用机制 | 第16页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂的分类 | 第16-17页 |
| 四、p21 的研究进展 | 第17-19页 |
| (一) p21~(WAF1/CIP1) 的克隆 | 第17页 |
| (二) p21 的作用 | 第17-18页 |
| (三) p21 的作用机制 | 第18-19页 |
| 五、药物筛选 | 第19-22页 |
| (一) 药物筛选模型的研究进展 | 第19-20页 |
| (二) 分子靶标的选取 | 第20-22页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第22-28页 |
| 一、实验材料 | 第22页 |
| (一) 细胞培养及其培养试剂 | 第22页 |
| (二) 原始质粒 | 第22页 |
| (三) 中药组分 | 第22页 |
| (四) 实验设备及仪器 | 第22页 |
| 二、实验方法 | 第22-28页 |
| (一) 质粒构建 | 第22-23页 |
| (二) 质粒的大量制备 | 第23-24页 |
| (三) 哺乳动物细胞培养 | 第24页 |
| (四) 哺乳动物细胞转染(磷酸钙瞬时转染) | 第24-25页 |
| (五) 相对荧光素酶活性(RLA)测定 | 第25页 |
| (六) 绿色荧光蛋白报告基因检测 | 第25页 |
| (七) 稳定转染细胞系的筛选 | 第25-26页 |
| (八) 哺乳动物细胞基因组DNA 的提取 | 第26-27页 |
| (九) 中药组分的初筛 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-38页 |
| 一、质粒构建及验证 | 第28-31页 |
| (一) 荧光素酶报告基因质粒的构建及验证 | 第28-29页 |
| (二) 绿色荧光蛋白报告基因质粒的构建及验证 | 第29-31页 |
| 二、组蛋白去乙酰化酶抑制剂 TSA 对p21~(WAF1/CIP1) 启动子的影响 | 第31-33页 |
| (一) 检测时间的确定 | 第31页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 TSA 的最佳处理浓度 | 第31-32页 |
| (三) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA 对pZS-p21-GFP 绿色荧光蛋白报告基因质粒的影响 | 第32-33页 |
| 三、稳定转染细胞系的建立及验证 | 第33-36页 |
| (一) pCI-p21-Luc 荧光素酶模型的验证 | 第33-34页 |
| (二) pZS-p21-GFP 绿色荧光蛋白模型的验证 | 第34-36页 |
| 四、中药组分的初筛 | 第36-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-41页 |
| 一、筛选模型的选择 | 第38页 |
| 二、药物靶标的选择 | 第38-39页 |
| 三、稳定转染细胞系的筛选 | 第39页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选 | 第39-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第48页 |
