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大白菜胞质雄性不育相关基因的克隆及差异表达研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
引言第11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·植物胞质雄性不育的发现及发生第12-13页
   ·胞质雄性不育的分子机理研究概况第13-21页
     ·胞质基因与CMS第13-20页
       ·线粒体基因与CMS 的关系第13-20页
       ·叶绿体基因组与CMS 的关系第20页
     ·核质互作的结果导致CMS 的发生第20-21页
   ·大白菜胞质雄性不育的研究概况第21页
   ·CMS 相关基因的克隆及差异表达研究的方法第21-24页
     ·图位克隆法第21-22页
     ·同源克隆法(序列克隆法)第22页
     ·mRNA 差异显示第22-23页
     ·改进的cDNA-AFLP 技术第23页
     ·RNA 指纹技术第23-24页
   ·CMS 研究中存在的问题及对策第24-26页
     ·胞质基因不具可比性第24页
     ·单个遗传系统研究的孤立性第24-25页
     ·CMS 研究中应加强新技术新方法的相互结合与运用第25-26页
第二章 材料和方法第26-31页
   ·材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·细菌和质粒第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·主要仪器第27页
   ·实验方法第27-31页
     ·大白菜线粒体DNA 的提取第27-28页
       ·试剂第27页
       ·操作程序第27-28页
     ·大白菜花蕾总RNA 提取第28页
       ·试剂及器材第28页
       ·操作程序第28页
     ·总RNA 的DNase 处理第28-29页
     ·反转录第29页
     ·PCR 扩增第29页
     ·目的片断回收第29页
     ·目的片段的克隆、测序第29-30页
       ·试剂准备第29-30页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第30页
       ·目的片断与T 载体的连接及转化第30页
     ·序列测定及序列分析第30页
     ·特异引物设计及合成第30-31页
第三章 结果与分析第31-49页
   ·大白菜线粒体DNA 的提取第31页
     ·大白菜线粒体DNA 电泳分析第31页
     ·大白菜线粒体DNA 的RAPD 扩增检测第31页
   ·大白菜花蕾总RNA 提取第31-33页
     ·RNA 完整性的检测第31-32页
     ·高速离心处理对RNA 纯度的影响第32页
     ·总RNA 经DNase 处理后质量检测第32-33页
     ·逆转录活性的检测第33页
   ·CMS7311 育性相关线粒体DNA 片断的克隆及序列分析第33-35页
     ·PCR 引物序列第33页
     ·CMS7311 育性相关线粒体DNA 片断的扩增第33页
     ·阳性克隆的酶切鉴定第33页
     ·序列测定及结构分析第33-35页
   ·两套大白菜胞质雄性不育材料orf224/atp6 位点的研究第35-39页
     ·PCR 引物序列及位置第35页
     ·orf224,atp6 特异引物分别在A_1、B_1、A_2 、B_2 的mtDNA 水平RNA 水平(反转录水平)的扩增结果第35-36页
     ·mtDNA 水平和RNA 水平orf224 片断扩增产物的克隆、测序及序列分析第36-39页
   ·大白菜雄性不育相关片断的RNA 指纹分析第39-46页
     ·cDNA-RAPD 引物筛选第39-40页
     ·特异片断的克隆、测序及序列分析第40-44页
     ·差异表达片断的特性研究第44-46页
       ·S176-343 特异表达片断的特性研究第44-45页
       ·S199-904 特异表达片断的特性研究第45-46页
   ·atp6 基因转录本的编辑位点研究第46-49页
     ·PCR 引物序列及编辑位点的检测方法第46页
     ·atp6 基因转录本的编辑位点研究第46-49页
第四章 讨论第49-54页
   ·关于线粒体DNA 的提取方法第49页
   ·关于RNA 的提取方法第49-50页
   ·orf224/atp6 位点和CMS第50-52页
   ·RNA 指纹技术应用于CMS 相关基因差异表达研究的可行性分析第52-53页
   ·RNA 编辑与CMS第53-54页
第五章 结论第54-55页
参考文献第55-64页
缩略词第64-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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