中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
缩略词对照表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-16页 |
第一部分 蓖麻毒素的提取与纯化 | 第16-27页 |
一 引言 | 第16-18页 |
二 实验部分 | 第18-20页 |
1.实验材料与仪器 | 第18页 |
·试剂 | 第18页 |
·仪器 | 第18页 |
2.实验方法 | 第18-20页 |
·蓖麻毒素的提取 | 第18-19页 |
·蓖麻毒素的纯化 | 第19-20页 |
·蓖麻毒素基本性质的考察 | 第20页 |
三 实验结果 | 第20-24页 |
1.粗提液亲和纯化结果 | 第20-21页 |
2.凝胶过滤纯化结果 | 第21页 |
3.SDS-PAGE纯度分析结果 | 第21-22页 |
4.质谱测定分子量 | 第22-23页 |
5.蓖麻毒素毒性考察结果 | 第23-24页 |
四 讨论 | 第24-25页 |
1.蓖麻毒素纯化条件的优化 | 第24页 |
2.亲和柱的维护 | 第24-25页 |
3.生物质谱测定分子量 | 第25页 |
五 小结 | 第25-27页 |
第二部分 生物质谱技术鉴定蓖麻毒素 | 第27-44页 |
一 设计思想 | 第27-28页 |
二 实验材料与方法 | 第28-32页 |
1.实验材料与仪器 | 第28-29页 |
·试剂 | 第28页 |
·仪器 | 第28-29页 |
2.实验方法 | 第29-32页 |
·肽质量指纹谱(PMF)技术鉴定蓖麻毒素 | 第29-30页 |
·HPLC-ESI/MS对蓖麻毒素肽谱的鉴定 | 第30-32页 |
三 实验结果 | 第32-38页 |
1.肽质量指纹谱(PMF)鉴定结果 | 第32-34页 |
2.蓖麻毒素胰酶切肽谱的HPLC分离条件确定 | 第34-36页 |
·流动相体系对分离效果的影响 | 第34-35页 |
·流速对分离效果的影响 | 第35-36页 |
3.蓖麻毒素肽谱的HPLC-ESI/MS鉴定结果 | 第36-38页 |
四 讨论 | 第38-43页 |
1.MALDI-TOF/MS和HPLC-ESI/MS鉴定结果的对比 | 第38-40页 |
2.酶切过程对结果的影响 | 第40页 |
3.尿素、SDS等助溶剂对酶解效果的影响 | 第40-42页 |
4.ESI/MS对多肽分子量的测定及分析 | 第42-43页 |
五 小结 | 第43-44页 |
第三部分 相思子毒素的提取纯化及生物质谱鉴定 | 第44-58页 |
一 引言 | 第44页 |
二 实验部分 | 第44-47页 |
1.实验材料与仪器 | 第44-45页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·仪器 | 第45页 |
2.实验方法 | 第45-47页 |
·相思子毒素的提取 | 第45页 |
·相思子毒素的纯化 | 第45-46页 |
·相思子毒素的毒性评价 | 第46页 |
·相思子毒素的鉴定 | 第46-47页 |
三 实验结果 | 第47-55页 |
1.亲和纯化结果 | 第47-48页 |
2.离子交换层析 | 第48-49页 |
3.纯度考察 | 第49页 |
4.相思子毒素毒性考察结果 | 第49页 |
5.相思子毒素的鉴定 | 第49-55页 |
·相思子毒素分子量的测定 | 第49-51页 |
·PMF鉴定 | 第51-55页 |
四 讨论 | 第55-57页 |
1.相思子毒素提取纯化过程的优化 | 第55页 |
2.溶剂对ESI/MS测定蛋白质分子量的影响 | 第55-56页 |
3.相思子毒素两种亚型性质对比 | 第56-57页 |
五 小结 | 第57-58页 |
结语 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
附录 | 第62-65页 |
综述 | 第65-75页 |
研究生期间撰写与发表文章 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |