冷季型香菇(Lentinula edodes)菌种的分子鉴定
中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-22页 |
1 香菇概述 | 第15页 |
2 香菇菌种鉴定研究现状 | 第15-22页 |
2.1 形态学水平上鉴定 | 第16页 |
2.2 分子学水平上鉴定 | 第16-21页 |
2.3 其他方法 | 第21-22页 |
第二章 香菇菌种ITS分析 | 第22-50页 |
1 试验材料 | 第22页 |
2 试验方法 | 第22-32页 |
2.1 试验所用试剂配制 | 第22-25页 |
2.2 试验所需试剂 | 第25页 |
2.3 基因组 DNA提取 | 第25-27页 |
2.3.1 供试培养基 | 第25页 |
2.3.2 菌丝体的获得 | 第25-26页 |
2.3.3 基因组 DNA的提取 | 第26-27页 |
2.3.4 基因组 DNA的检测 | 第27页 |
2.3.4.1 制胶 | 第27页 |
2.3.4.2 点样 | 第27页 |
2.3.4.3 电泳 | 第27页 |
2.3.4.4 照相 | 第27页 |
2.4 PCR扩增 | 第27-28页 |
2.4.1 PCR反应所用引物 | 第28页 |
2.4.2 PCR反应条件 | 第28页 |
2.5 PCR扩增产物的克隆 | 第28-32页 |
2.5.1 PCR产物的纯化 | 第28页 |
2.5.2 感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
2.5.3 PCR产物的连接 | 第29页 |
2.5.4 重组质粒转入感受态细胞 | 第29-30页 |
2.5.5 转化菌落的转种培养 | 第30页 |
2.5.6 阳性重组质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
2.5.6.1 质粒DNA的提取缓冲液 | 第30页 |
2.5.6.2 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
2.5.7 阳性重组质粒的检测 | 第31-32页 |
2.5.7.1 酶切鉴定 | 第31页 |
2.5.7.2 PCR鉴定 | 第31-32页 |
2.6 PCR克隆产物的序列测定 | 第32页 |
2.7 DNA序列分析 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-48页 |
3.1 基因组 DNA的提取 | 第32-33页 |
3.2 PCR反应的适宜条件 | 第33页 |
3.2.1 模板浓度 | 第33页 |
3.2.2 扩增参数 | 第33页 |
3.3 PCR扩增产物 | 第33页 |
3.4 PCR产物的克隆 | 第33-35页 |
3.5 DNA序列分析 | 第35-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 基因组DNA的提取 | 第48-49页 |
4.2 DNA序列分析 | 第49-50页 |
第三章 香菇菌种的RAPD分析 | 第50-63页 |
1 试验材料 | 第50页 |
2 试验方法 | 第50-52页 |
2.1 基因组 DNA提取 | 第50页 |
2.2 RAPD扩增 | 第50-52页 |
2.2.1 RAPD扩增所用引物 | 第50页 |
2.2.2 RAPD扩增反应条件的优化 | 第50-52页 |
2.2.3 RAPD扩增 | 第52页 |
2.2.4 产物检测及数据分析 | 第52页 |
3 结果与分析 | 第52-61页 |
3.1 RAPD条件的优化 | 第52-53页 |
3.1.1 模板 DNA浓度 | 第52页 |
3.1.2 Mh~2+离子和dNTP浓度 | 第52-53页 |
3.1.3 Taq酶 | 第53页 |
3.2 RAPD扩增 | 第53-61页 |
3.2.1 RAPD扩增产物 | 第53页 |
3.2.2 菌株间的遗传多样性与遗传相似性分析 | 第53-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
4.1 RAPD条件的优化 | 第61-62页 |
4.2 RAPD扩增 | 第62-63页 |
第四章 香菇菌种的ISSR分子标记 | 第63-75页 |
1 试验材料 | 第63页 |
2 试验方法 | 第63-65页 |
2.1 基因组DNA提取 | 第63页 |
2.2 ISSR扩增 | 第63-65页 |
2.2.1 ISSR扩增所用引物 | 第63页 |
2.2.2 ISSR扩增反应条件的优化 | 第63-65页 |
2.2.3 ISSR扩增 | 第65页 |
2.2.4 产物检测及数据分析 | 第65页 |
3 结果与分析 | 第65-74页 |
3.1 ISSR条件的优化 | 第65页 |
3.2 ISSR扩增 | 第65-74页 |
3.2.1 ISSR扩增产物 | 第65-69页 |
3.2.2 菌株间的遗传多样性与遗传相似性分析 | 第69-74页 |
4 讨论 | 第74-75页 |
4.1 ISSR条件的优化 | 第74页 |
4.2 ISSR扩增 | 第74-75页 |
第五章 香菇菌种的栽培性状研究 | 第75-86页 |
1 试验材料 | 第75页 |
2 试验方法 | 第75-76页 |
2.1 供试培养基 | 第75页 |
2.2 菌丝的活化 | 第75页 |
2.3 菌丝生长速率的测定 | 第75页 |
2.4 拮抗试验 | 第75-76页 |
2.5 栽培试验 | 第76页 |
3 结果与分析 | 第76-83页 |
3.1 菌丝生长速率 | 第76页 |
3.2 拮抗试验 | 第76页 |
3.3 栽培试验 | 第76-83页 |
4 讨论 | 第83-86页 |
4.1 菌丝生长速率 | 第83页 |
4.2 拮抗试验 | 第83-84页 |
4.3 出菇试验 | 第84-86页 |
第六章 讨论与结论 | 第86-91页 |
参考文献 | 第91-98页 |
致谢 | 第98页 |