摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 概论 | 第8-29页 |
第一节 干细胞研究概述 | 第8-16页 |
1.成体干细胞 | 第8-9页 |
2.成体干细胞的生物学特点 | 第9-10页 |
3.脐血干细胞 | 第10页 |
4.骨髓基质干细胞与骨髓间充质干细胞 | 第10-11页 |
5.脂肪间充质干细胞 | 第11-12页 |
6.皮肤干细胞 | 第12-13页 |
7.造血干细胞 | 第13页 |
8.成体干细胞组织工程 | 第13-16页 |
第二节 胚胎干细胞 | 第16-24页 |
1.胚胎发育与胚胎干细胞研究简述 | 第16-18页 |
2.胚胎干细胞的研究历史 | 第18-19页 |
3.ES细胞的特性 | 第19-20页 |
4.胚胎干细胞建系 | 第20页 |
5.ES细胞分化各种成体细胞的特性 | 第20-21页 |
6.ES细胞的应用前景 | 第21-24页 |
第三节 小鼠胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞 | 第24-27页 |
1.ES细胞的培养和分化 | 第24-25页 |
2.ES细胞向神经细胞定向诱导分化 | 第25页 |
3.无血清条件培养ES细胞定向诱导分化神经细胞 | 第25-27页 |
本课题的研究自的和意义 | 第27-29页 |
第二章 小鼠胚胎干细胞建系及其特性的研究 | 第29-42页 |
第一节 前言 | 第29-30页 |
第二节 材料和方法 | 第30-37页 |
1.材料 | 第30-31页 |
2.试剂配制 | 第31-32页 |
3.仪器 | 第32页 |
4.MEF细胞的原代分离和培养 | 第32-33页 |
5.小鼠ES细胞的分离和培养 | 第33-35页 |
6.小鼠ES细胞的鉴定 | 第35-37页 |
第三节 实验结果 | 第37-40页 |
1.两种小鼠得胚率、贴壁比率 | 第37页 |
2.小鼠胚胎分离和贴壁过程 | 第37-40页 |
第四节 分析与讨论 | 第40-42页 |
1.饲养层细胞对胚胎贴壁和增殖的影响 | 第40页 |
2.种系和季节对得胚率和胚胎贴壁增殖率的影响 | 第40-41页 |
3.获取ICM方法、消化液浓度和作用时间的选择 | 第41-42页 |
第三章 胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞及其特性的研究 | 第42-56页 |
第一节 前言 | 第42-43页 |
第二节 ES细胞诱导分化神经细胞 | 第43-49页 |
1.材料 | 第43-44页 |
2.仪器 | 第44-45页 |
3.方法 | 第45-49页 |
3.1.小鼠ES细胞的培养 | 第45页 |
3.2.EBs的培养 | 第45-46页 |
3.3.不同浓度RA诱导分化神经细胞 | 第46页 |
3.4.不同大小的EBs诱导分化神经细胞 | 第46-47页 |
3.5.撤除RA后时间序列上分化神经细胞 | 第47页 |
3.6.分化神经细胞的免疫细胞化学检测 | 第47页 |
3.7.RT-PCR检测分化神经细胞特异性mRNA转录 | 第47-49页 |
3.8.NMDA刺激下分化神经细胞内钙离子的变化 | 第49页 |
第三节 实验结果 | 第49-54页 |
1.胚胎干细胞、拟胚体、分化后免疫细胞化学检测 | 第49-50页 |
2.ES细胞分化为神经样细胞的比率 | 第50-51页 |
3.分化后时间序列上神经样细胞NMDA受体亚型表达的检测 | 第51-53页 |
4.分化神经细胞Calbindin D28、NMDA受体亚型表达的检测 | 第53页 |
5.分化神经细胞NMDA受体的活性的检测 | 第53-54页 |
第四节 分析与讨论 | 第54-56页 |
第四章 胚胎干细胞分化神经细胞信号转导机制的研究 | 第56-67页 |
第一节 维持ES细胞不分化状态的机制 | 第56-61页 |
1.维持ES细胞不分化的因素 | 第56-57页 |
2.维持ES细胞不分化的信号转导机制 | 第57-61页 |
2.1.LIF受体及信号转导机制 | 第57-59页 |
2.2.ES细胞中Oct-3/4的功能及其表达的调控 | 第59-60页 |
2.3.BMP/Smad/Id信号通路 | 第60页 |
2.4.LIF/STAT3与BMP/Smad/Id信号通路的协同作用 | 第60-61页 |
第二节 RA诱导ES细胞分化神经细胞的机制 | 第61-67页 |
1.RA受体 | 第61-62页 |
2.RA信号转导 | 第62-66页 |
3.讨论 | 第66-67页 |
第五章 总结与展望 | 第67-71页 |
第一节 研究工作总结 | 第67-68页 |
第二节 展望 | 第68-71页 |
相关论文发表情况 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
致谢 | 第79页 |