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胚胎干细胞分化神经细胞特性及分化机制的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 概论第8-29页
 第一节 干细胞研究概述第8-16页
  1.成体干细胞第8-9页
  2.成体干细胞的生物学特点第9-10页
  3.脐血干细胞第10页
  4.骨髓基质干细胞与骨髓间充质干细胞第10-11页
  5.脂肪间充质干细胞第11-12页
  6.皮肤干细胞第12-13页
  7.造血干细胞第13页
  8.成体干细胞组织工程第13-16页
 第二节 胚胎干细胞第16-24页
  1.胚胎发育与胚胎干细胞研究简述第16-18页
  2.胚胎干细胞的研究历史第18-19页
  3.ES细胞的特性第19-20页
  4.胚胎干细胞建系第20页
  5.ES细胞分化各种成体细胞的特性第20-21页
  6.ES细胞的应用前景第21-24页
 第三节 小鼠胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞第24-27页
  1.ES细胞的培养和分化第24-25页
  2.ES细胞向神经细胞定向诱导分化第25页
  3.无血清条件培养ES细胞定向诱导分化神经细胞第25-27页
 本课题的研究自的和意义第27-29页
第二章 小鼠胚胎干细胞建系及其特性的研究第29-42页
 第一节 前言第29-30页
 第二节 材料和方法第30-37页
  1.材料第30-31页
  2.试剂配制第31-32页
  3.仪器第32页
  4.MEF细胞的原代分离和培养第32-33页
  5.小鼠ES细胞的分离和培养第33-35页
  6.小鼠ES细胞的鉴定第35-37页
 第三节 实验结果第37-40页
  1.两种小鼠得胚率、贴壁比率第37页
  2.小鼠胚胎分离和贴壁过程第37-40页
 第四节 分析与讨论第40-42页
  1.饲养层细胞对胚胎贴壁和增殖的影响第40页
  2.种系和季节对得胚率和胚胎贴壁增殖率的影响第40-41页
  3.获取ICM方法、消化液浓度和作用时间的选择第41-42页
第三章 胚胎干细胞定向诱导分化神经细胞及其特性的研究第42-56页
 第一节 前言第42-43页
 第二节 ES细胞诱导分化神经细胞第43-49页
  1.材料第43-44页
  2.仪器第44-45页
  3.方法第45-49页
   3.1.小鼠ES细胞的培养第45页
   3.2.EBs的培养第45-46页
   3.3.不同浓度RA诱导分化神经细胞第46页
   3.4.不同大小的EBs诱导分化神经细胞第46-47页
   3.5.撤除RA后时间序列上分化神经细胞第47页
   3.6.分化神经细胞的免疫细胞化学检测第47页
   3.7.RT-PCR检测分化神经细胞特异性mRNA转录第47-49页
   3.8.NMDA刺激下分化神经细胞内钙离子的变化第49页
 第三节 实验结果第49-54页
  1.胚胎干细胞、拟胚体、分化后免疫细胞化学检测第49-50页
  2.ES细胞分化为神经样细胞的比率第50-51页
  3.分化后时间序列上神经样细胞NMDA受体亚型表达的检测第51-53页
  4.分化神经细胞Calbindin D28、NMDA受体亚型表达的检测第53页
  5.分化神经细胞NMDA受体的活性的检测第53-54页
 第四节 分析与讨论第54-56页
第四章 胚胎干细胞分化神经细胞信号转导机制的研究第56-67页
 第一节 维持ES细胞不分化状态的机制第56-61页
  1.维持ES细胞不分化的因素第56-57页
  2.维持ES细胞不分化的信号转导机制第57-61页
   2.1.LIF受体及信号转导机制第57-59页
   2.2.ES细胞中Oct-3/4的功能及其表达的调控第59-60页
   2.3.BMP/Smad/Id信号通路第60页
   2.4.LIF/STAT3与BMP/Smad/Id信号通路的协同作用第60-61页
 第二节 RA诱导ES细胞分化神经细胞的机制第61-67页
  1.RA受体第61-62页
  2.RA信号转导第62-66页
  3.讨论第66-67页
第五章 总结与展望第67-71页
 第一节 研究工作总结第67-68页
 第二节 展望第68-71页
相关论文发表情况第71-72页
参考文献第72-79页
致谢第79页

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