| 第1章 综述 | 第1-23页 |
| ·酪氨酸酶简介与研究进展 | 第8-10页 |
| ·酪氨酸酶简介 | 第8-10页 |
| ·酪氨酸酶作用机制 | 第8-9页 |
| ·酪氨酸酶的结构与性质 | 第9-10页 |
| ·酪氨酸酶的研究进展 | 第10页 |
| ·酪氨酸酶相关的蛋白家族 | 第10-14页 |
| ·酪氨酸酶相关蛋白家族基因及其表达的调控 | 第10-12页 |
| ·酪氨酸酶基因家族 | 第11页 |
| ·黑素细胞特异基因表达的转录和调控 | 第11-12页 |
| ·酪氨酸酶及其相关蛋白与色素形成 | 第12-14页 |
| ·酪氨酸酶及其相关蛋白简介 | 第12-13页 |
| ·TRPs 和黑素合成 | 第13-14页 |
| ·黑色素 | 第14-16页 |
| ·黑色素种类及结构 | 第14-15页 |
| ·黑色素的主要特征 | 第15页 |
| ·黑色素的生物功能 | 第15-16页 |
| ·黑色素与黑色素瘤 | 第16页 |
| ·与酪氨酸酶相关的疾病 | 第16-18页 |
| ·白癜风 | 第16-17页 |
| ·白化病 | 第17-18页 |
| ·短肽Tat简介 | 第18页 |
| ·大肠杆菌表达系统简介 | 第18-19页 |
| ·大肠杆菌表达系统调控元件 | 第19-21页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-45页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌种与质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·培养基及配方 | 第23-24页 |
| ·溶液及部分酶的配制 | 第24-26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-45页 |
| ·编码酪氨酸酶基因的获得与鉴定 | 第26-35页 |
| ·小鼠黑色素瘤总RNA的制备 | 第26-28页 |
| ·引物设计与合成 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR | 第29-32页 |
| ·酪氨酸酶 cDNA 的克隆及DNA序列测定 | 第32-35页 |
| ·酪氨酸酶原核表达质粒的构建及表达 | 第35-39页 |
| ·酪氨酸酶原核表达质粒的构建 | 第35-39页 |
| ·重组酪氨酸酶的表达 | 第39页 |
| ·重组酪氨酸酶基因所表达的蛋白质的检测 | 第39-43页 |
| ·原理 | 第39-40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·溶液配制 | 第40-42页 |
| ·实验流程 | 第42-43页 |
| ·重组酪氨酸酶的纯化及氨基酸序列测定 | 第43-44页 |
| ·酪氨酸酶活性测定 | 第44-45页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第45-63页 |
| ·结果 | 第45-58页 |
| ·小鼠黑色素瘤总RNA的制备 | 第45页 |
| ·RT-PCR 获取小鼠酪氨酸酶cDNA及序列测定 | 第45-47页 |
| ·酪氨酸酶野生型及其变异型在大肠杆菌中的表达 | 第47-58页 |
| ·酪氨酸酶野生型的表达 | 第47-50页 |
| ·酪氨酸酶变异型的表达 | 第50-56页 |
| ·表达条件的研究 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-63页 |
| ·表达质粒的构建 | 第58-60页 |
| ·诱导表达 | 第60页 |
| ·目的蛋白的溶解性与活性 | 第60-63页 |
| 总结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |