| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-37页 |
| 1．1 苏云金杆菌的历史回顾 | 第13页 |
| 1．2 苏云金杆菌的杀虫机理 | 第13-20页 |
| 1．2．1 苏云金杆菌的杀虫成分 | 第13页 |
| 1．2．2 δ-内毒素的杀虫机理 | 第13-14页 |
| 1．2．3 δ-内毒素的受体 | 第14-20页 |
| 1．3 抗虫转基因作物的研究与应用 | 第20-24页 |
| 1．3．1 转BT基因作物的研究与发展 | 第20-21页 |
| 1．3．2 转BT基因棉的应用 | 第21-23页 |
| 1．3．3 BT棉的风险与效益 | 第23-24页 |
| 1．4 害虫对BT的抗性及机理 | 第24-30页 |
| 1．4．1 害虫对BT产生抗性的情况 | 第24-25页 |
| 1．4．2 害虫抗BT的机理 | 第25-28页 |
| 1．4．3 害虫对BT的抗性遗传 | 第28-29页 |
| 1．4．4 害虫BT抗性基因的鉴定 | 第29-30页 |
| 1．5 害虫对转BT基因作物的抗性 | 第30-32页 |
| 1．6 害虫对转BT基因作物抗性的治理 | 第32-33页 |
| 1．7 害虫抗药性的分子检测技术 | 第33-34页 |
| 1．7．1 PCR限制性内切酶法 | 第33页 |
| 1．7．2 单链构型多态型分析技术 | 第33页 |
| 1．7．3 等位基因特异性PCR技术 | 第33-34页 |
| 1．8 昆虫对BT作物抗性监测技术 | 第34-35页 |
| 1．8．1 抗性倍数法 | 第34页 |
| 1．8．2 区分剂量法 | 第34页 |
| 1．8．3 抗性种群单对杂交检测法 | 第34页 |
| 1．8．4 单雌系F_2代检测法 | 第34-35页 |
| 1．8．5 抗性基因分子检测法 | 第35页 |
| 1．9 棉铃虫的抗药性情况 | 第35-36页 |
| 1．10 本研究的立题依据与目的意义 | 第36-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-43页 |
| 2．1 供试棉铃虫 | 第37页 |
| 2．2 RNA的分离纯化 | 第37页 |
| 2．3 cDNA第一链合成 | 第37-39页 |
| 2．4 氨肽酶和钙粘素cDNA克隆的引物设计与PCR扩增 | 第39-41页 |
| 2．4．1 氨肽酶扩增的引物序列与PCR条件 | 第39-40页 |
| 2．4．2 钙粘素cDNA扩增的引物序列与PCR条件 | 第40-41页 |
| 2．5 PCR产物克隆与测序 | 第41页 |
| 2．6 序列比对与分析 | 第41页 |
| 2．7 基因组DNA的提取 | 第41页 |
| 2．8 钙粘素基因的克隆与测序 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-59页 |
| 3．1 棉铃虫幼虫中肠氨肽酶的克隆 | 第43-52页 |
| 3．1．1 敏感棉铃虫幼虫中肠氨肽酶的结构特征 | 第43-44页 |
| 3．1．2 抗性品系与敏感品系棉铃虫氨肽酶的序列差异 | 第44-49页 |
| 3．1．3 氨肽酶的同源性与系统进化分析 | 第49-52页 |
| 3．2 棉铃虫幼虫中肠钙粘素的特征 | 第52-54页 |
| 3．2．1 棉铃虫幼虫中肠钙粘素蛋白的基本结构与同源性 | 第52-53页 |
| 3．2．2 棉铃虫抗性品系钙粘素基因突变 | 第53-54页 |
| 3．3 棉铃虫钙粘素基因DNA序列的特征 | 第54-55页 |
| 3．4 棉铃虫钙粘素基因突变的分子检测技术 | 第55-58页 |
| 3．4．1 PASA引物的选择 | 第55页 |
| 3．4．2 PCR反应条件优化与检测 | 第55-58页 |
| 3．5 田间棉铃虫对转BT基因棉抗性的检测 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-64页 |
| 4．1 昆虫中肠BT毒素受体的种类及与抗性的关系 | 第59页 |
| 4．2 棉铃虫钙粘素突变与抗性的关系 | 第59-60页 |
| 4．3 棉铃虫的APN及与BT抗性的关系 | 第60-61页 |
| 4．4 棉铃虫钙粘素基因的结构特征 | 第61-62页 |
| 4．5 棉铃虫对BT棉抗性的监测技术与抗性治理 | 第62-64页 |
| 全文主要结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-79页 |
| 附录一 棉铃虫敏感品系与抗性品系APN1的序列比对 | 第79-81页 |
| 附录二 棉铃虫敏感品系与抗性品系APN2的序列比对 | 第81-83页 |
| 附录三 棉铃虫敏感品系与抗性品系APN3的序列比对 | 第83-85页 |
| 附录四 棉铃虫敏感品系与抗性品系APN4的序列比对 | 第85-87页 |
| 附录五 棉铃虫敏感品系与抗性品系钙粘素MRNA序列比对 | 第87-89页 |
| 附录六 棉铃虫钙粘素基因的DNA序列比对 | 第89-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 攻读博士期间发表的论文目录 | 第99页 |
