中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第12-27页 |
1 抗体片段的多种形式 | 第13-14页 |
2 抗体结构分区及胚系基因 | 第14-15页 |
3 噬菌体展示技术的原理及种类 | 第15-20页 |
4 抗体库技术的发展 | 第20-21页 |
5 噬菌体抗体库 | 第21-26页 |
6 结语 | 第26-27页 |
试验一 天然鼠源单链抗体库的构建 | 第27-43页 |
1 试验材料 | 第27-30页 |
2 试验方法 | 第30-38页 |
·脾细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
·cDNA第一链的合成 | 第31页 |
·抗体重链可变区VH和轻链可变区VL基因片段的扩增 | 第31-32页 |
·VH和VL DNA扩增产物的纯化及定量 | 第32-33页 |
·加端PCR修饰VL基因 | 第33页 |
·ScFv基因的组装 | 第33-34页 |
·ScFv基因的二次扩增 | 第34-35页 |
·ScFv基因的内切酶消化 | 第35-36页 |
·ScFv基因与PCANTAB-5E载体的连接 | 第36页 |
·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第36页 |
·转化 | 第36-37页 |
·噬菌粒DNA的提取 | 第37页 |
·转化子的鉴定 | 第37-38页 |
·噬菌体单链抗体表面展示文库的构建 | 第38页 |
3 试验结果 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
试验二 猪IgG 的筛选 | 第43-49页 |
1 试验材料 | 第43-45页 |
2 试验方法 | 第45-46页 |
·对数生长期E.coli TG1的制备 | 第45页 |
·重组噬菌体的PEG沉淀 | 第45页 |
·淘选 | 第45页 |
·噬菌体抗体克隆的检测 | 第45-46页 |
3 ELISA检测结果 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
结论 | 第49-50页 |
本课题的创新之处 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
发表的文章 | 第61页 |