| 第一章 文献综述 | 第1-39页 |
| ·阳离子抗菌肽的简介 | 第14页 |
| ·抗菌肽的种类 | 第14-30页 |
| ·哺乳动物抗菌肽 | 第14-17页 |
| ·呈两亲α-螺旋的抗菌肽类 | 第15页 |
| ·形成分子内二硫键的抗细菌肽类 | 第15-16页 |
| ·富含脯氨酸精氨酸的抗细菌肽类 | 第16-17页 |
| ·既抗细菌又抗真菌或病毒的抗菌肽类 | 第17页 |
| ·植物抗菌肽 | 第17-20页 |
| ·硫堇 | 第18页 |
| ·植物防卫素 | 第18-19页 |
| ·脂转移蛋白 | 第19页 |
| ·hevein类和knottin抗菌肽 | 第19-20页 |
| ·含4个Cys的抗菌肽 | 第20页 |
| ·昆虫抗菌肽 | 第20-24页 |
| ·昆虫抗细菌肽 | 第20-23页 |
| ·形成两性分子α-helix的抗细菌肽类 | 第20-21页 |
| ·有分子内二硫桥的抗细菌肽类 | 第21-22页 |
| ·富含脯氨酸的抗细菌肽类 | 第22页 |
| ·富含甘氨酸的抗细菌多肽类 | 第22-23页 |
| ·昆虫抗真菌肽 | 第23页 |
| ·昆虫既抗真菌又抗细菌肽 | 第23-24页 |
| ·两栖类抗菌肽 | 第24-25页 |
| ·蛙皮素-富含脯氨酸的抗菌肽 | 第24页 |
| ·两栖类抗菌肽的多样性 | 第24-25页 |
| ·微生物中的抗菌肽 | 第25-27页 |
| ·细菌素和细菌素类似物 | 第25-26页 |
| ·酵母和丝状真菌中的嗜杀毒素 | 第26-27页 |
| ·抗菌肽的抗菌分子机理 | 第27-28页 |
| ·抗菌肽的抗菌应用前景 | 第28-30页 |
| ·有关实验技术 | 第30-39页 |
| ·质粒的提取与纯化 | 第30-31页 |
| ·DNA的凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·基因工程表达系统 | 第32-35页 |
| ·PCR技术 | 第35-36页 |
| ·外源基因的转化 | 第36-37页 |
| ·常用肽类分析技术 | 第37-39页 |
| 第二章 基因转化,his+Muts表型菌株和高拷贝菌株的筛选 | 第39-47页 |
| ·研究方案 | 第39页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39-40页 |
| ·仪器设备 | 第40页 |
| ·试验操作 | 第40-44页 |
| ·重组质粒pPIC9-Atmp的提取 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pPIC9-Atmp的纯化和线性化处理 | 第41-42页 |
| ·电穿孔转化 | 第42-44页 |
| ·筛选阳性克隆 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·his+Muts表型菌株的筛选结果 | 第44-46页 |
| 本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 目的蛋白的诱导表达与分析 | 第47-56页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47页 |
| ·试验操作 | 第47-53页 |
| ·阳离子抗菌肽的诱导表达 | 第47-48页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第48-52页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳缓冲液系统的建立 | 第48-49页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳垂直板凝胶的制备 | 第49-51页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第51页 |
| ·蛋白样品的凝胶电泳 | 第51页 |
| ·凝胶电泳的染色 | 第51-52页 |
| ·蛋白表达量的测定 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-55页 |
| ·电泳结果 | 第53-54页 |
| ·蛋白表达量的测定结果 | 第54-55页 |
| 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 重组蛋白体外抑菌活性研究和部分发酵条件优化 | 第56-65页 |
| ·试验材料 | 第56页 |
| ·菌种 | 第56页 |
| ·试剂 | 第56页 |
| ·仪器设备 | 第56页 |
| ·试验操作 | 第56-57页 |
| ·重组阳离子抗菌肽发酵上清液的体外抑菌活性检验 | 第56-57页 |
| ·重组阳离子抗菌肽发酵上清液的体外抑菌活性和Amp的比较 | 第57页 |
| ·摇瓶发酵部分发酵条件的优化 | 第57-58页 |
| ·不同生长培养基的选择 | 第57页 |
| ·生长培养基初始pH对工程菌体生长的影响 | 第57页 |
| ·生长时间对工程菌生物量的影响 | 第57-58页 |
| ·诱导时间对阳离子抗菌肽诱导表达的影响 | 第58页 |
| ·试验结果和分析 | 第58-64页 |
| ·重组阳离子抗菌肽发酵上清液的体外抑菌活性检验结果及分析 | 第58-59页 |
| ·诱导表达产物发酵上清液抑菌能力和氨苄青霉素(Amp)的比较结果分析 | 第59-60页 |
| ·基因工程菌最适生长培养基 | 第60-61页 |
| ·基因工程菌株生长的最适初始pH | 第61页 |
| ·基因工程菌株生长曲线 | 第61-62页 |
| ·诱导时间对阳离子抗菌肽诱导表达的影响 | 第62-64页 |
| 本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录一 | 第71-74页 |
| 附录二 | 第74-75页 |
| 致 谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第76页 |
