| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-42页 |
| 第一章 传染性支气管炎病毒研究概述 | 第16-23页 |
| 1 IBV形态结构 | 第17页 |
| 2 IBV的基因组结构 | 第17-19页 |
| 3 IBV的主要结构蛋白与功能 | 第19-20页 |
| 3．1 S蛋白 | 第19-20页 |
| 3．2 M蛋白 | 第20页 |
| 3．3 N蛋白 | 第20页 |
| 4 IBV分子变异机理 | 第20-21页 |
| 5 IBV疫苗的研究 | 第21-23页 |
| 第二章 转基因植物生产疫苗的研究进展 | 第23-31页 |
| 1 转基因植物生产疫苗原理和策略 | 第23页 |
| 2 转基因植物疫苗的免疫原理 | 第23-24页 |
| 3 转基因植物生产疫苗的潜在优势 | 第24-25页 |
| 4 转基因植物疫苗模式植物开发的现状、存在的问题 | 第25-26页 |
| 5 转基因植物疫苗研究现状 | 第26-29页 |
| 5．1 乙型肝炎表面抗原（HBsAg）在植物中的表达 | 第26-27页 |
| 5．2 诺沃克病毒外壳蛋白（NVCP）在植物中的表达 | 第27页 |
| 5．3 猪传染性肠胃炎病毒（TGEV）S蛋白在植物中表达 | 第27-28页 |
| 5．4 大肠杆菌热敏肠毒素B亚单位（LT-B） | 第28页 |
| 5．5 霍乱毒素B亚基（CT-B）在植物中表达 | 第28-29页 |
| 5．6 口蹄疫病毒VP1基因在植物中的表达 | 第29页 |
| 5．7 狂犬病植物疫苗 | 第29页 |
| 6 植物疫苗存在问题和讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 植物遗传转化 | 第31-42页 |
| 1 植物基因转化受体系统应具备的条件 | 第31-32页 |
| 1．1 高效稳定的再生能力 | 第31页 |
| 1．2 较高的遗传稳定性 | 第31页 |
| 1．3 具有稳定的外植体来源 | 第31页 |
| 1．4 对选择性抗生素敏感 | 第31-32页 |
| 1．5 对农杆菌侵染有敏感性 | 第32页 |
| 2 植物遗传转化的受体系统及其特性 | 第32-35页 |
| 2．1 愈伤组织再生系统 | 第32页 |
| 2．2 直接分化再生系统 | 第32-33页 |
| 2．3 原生质体再生系统 | 第33页 |
| 2．4 胚状体再生系统 | 第33-34页 |
| 2．5 生殖细胞受体系统 | 第34-35页 |
| 3 植物遗传转化的载体系统 | 第35-38页 |
| 3．1 病毒载体系统 | 第35页 |
| 3．2 农杆菌质粒载体系统 | 第35-38页 |
| 4 植物遗传转化方法 | 第38-40页 |
| 5 转基因植物中外源基因的表达状况与转基因植物的遗传行为 | 第40-42页 |
| 5．1 转基因植物中外源基因的整合 | 第40页 |
| 5．2 转基因植物中外源基因的沉默 | 第40-42页 |
| 第二部分 研究内容 | 第42-85页 |
| 第一章 IBV-SC021202毒株S1基因的克隆与遗传变异分析 | 第42-57页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1．1 病毒 | 第42页 |
| 1．2 菌种、质粒 | 第42页 |
| 1．3 SPF来杭鸡种蛋 | 第42页 |
| 1．4 抗生素 | 第42页 |
| 1．5 常用缓冲液 | 第42页 |
| 1．6 常用化学试剂及主要仪器 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-46页 |
| 2．1 病毒的增殖、纯化、浓缩及病毒RNA的提取 | 第42-44页 |
| 2．2 克隆 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-56页 |
| 3．1 病毒纯化、浓缩 | 第46页 |
| 3．2 RT-PCR | 第46-47页 |
| 3．3 重组质粒PCR鉴定 | 第47页 |
| 3．4 重组质粒双酶切鉴定 | 第47-48页 |
| 3．5 基因序列的测定 | 第48-49页 |
| 3．6 不同IBV毒株S1基因遗传变异分析 | 第49-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第二章 IBV-H52S基因植物表达载体的构建 | 第57-67页 |
| 1 材料 | 第57页 |
| 1．1 标准参考毒株 | 第57页 |
| 1．2 菌种、质粒 | 第57页 |
| 1．3 酶、化学试剂 | 第57页 |
| 1．4 抗生素 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-62页 |
| 2．1 PCR引物设计与合成 | 第57页 |
| 2．2 PCR扩增IBVS基因 | 第57-58页 |
| 2．3 IBV S PCR产物的纯化（QIA quick PCR Purification Kit纯化法） | 第58-59页 |
| 2．4 纯化的PCR产物双酶切及割胶回收 | 第59页 |
| 2．5 pBI121质粒的扩繁、提取、酶切及纯化 | 第59-61页 |
| 2．6 pBI121和IBV S基因酶切产物的连接和转化 | 第61页 |
| 2．7 重组克隆的筛选与鉴定 | 第61-62页 |
| 2．8 重组的植物表达载体导入受体农杆菌 | 第62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-66页 |
| 3．1 IBV S基因的获得及序列测定 | 第62-63页 |
| 3．2 基因序列的测定 | 第63-64页 |
| 3．3 植物中间表达载体的构建与鉴定 | 第64-65页 |
| 3．4 根癌农杆菌的转化与鉴定 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 第三章 马铃薯再生体系的建立 | 第67-69页 |
| 1 材料 | 第67页 |
| 1．1 植物材料 | 第67页 |
| 1．2 培养基及化学试剂 | 第67页 |
| 1．3 植物激素 | 第67页 |
| 2 方法 | 第67-68页 |
| 2．1 无菌试管苗的扩繁 | 第67页 |
| 2．2 马铃薯再生体系的建立 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68页 |
| 3．1 不同处理对马铃薯外植体愈伤形成的影响 | 第68页 |
| 3．2 不同植物激素对愈伤分化的影响 | 第68页 |
| 4 讨论 | 第68-69页 |
| 第四章 IBV-H52S基因马铃薯转化和转基因植株的获得 | 第69-79页 |
| 1 材料 | 第69页 |
| 1．1 植物材料 | 第69页 |
| 1．2 根癌农杆菌菌株及载体 | 第69页 |
| 1．3 培养基及其添加成分 | 第69页 |
| 1．4 缓冲液和试剂的配制及分子生物学试剂 | 第69页 |
| 1．5 同位素[α~（32）-P]dCTP | 第69页 |
| 2 方法 | 第69-74页 |
| 2．1 马铃薯的转化 | 第69-70页 |
| 2．2 转基因植株的分子生物学鉴定 | 第70-74页 |
| 3 结果与分析 | 第74-76页 |
| 3．1 马铃薯的转化和再生植株的形成 | 第74-75页 |
| 3．2 转基因马铃薯的分子生物学检测 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-79页 |
| 4．1 培养基中不同激素配比对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响 | 第76页 |
| 4．2 激素、农杆菌及农杆菌浓度对遗传转化的影响 | 第76-77页 |
| 4．3 外源基因的整合与表达 | 第77页 |
| 4．4 外源蛋白在转基因植物中表达量 | 第77页 |
| 4．5 基因组DNA的抽提方法 | 第77-79页 |
| 第五章 转基因马铃薯试管薯的诱生和表达抗原蛋白的检测 | 第79-85页 |
| 1 材料 | 第79页 |
| 1．1 植物材料 | 第79页 |
| 1．2 植物激素、酶、缓冲液及化学试剂 | 第79页 |
| 2 方法 | 第79-81页 |
| 2．1 转基因马铃薯试管薯的诱生及转基因植株的田间繁殖 | 第79页 |
| 2．2 植物总RNA的提取及Northern blot分析 | 第79-80页 |
| 2．3． 植物可溶性蛋白质的提取及Western blot分析 | 第80-81页 |
| 3 结果与分析 | 第81-84页 |
| 3．1 转基因马铃薯试管薯的诱生及田间繁殖 | 第81-82页 |
| 3．2 转基因马铃薯Northern blot分析结果 | 第82-83页 |
| 3．3 转基因植物可溶性总蛋白SDS-PAGE电泳 | 第83页 |
| 3．4 Western blot检测 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 附录A | 第93-95页 |
| 附录B | 第95-100页 |
| 附录C | 第100-107页 |
