中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
引言 | 第7-16页 |
1 聚-β-羟基烷酸生物合成研究进展 | 第7-14页 |
2 本实验研究内容、意义及技术路线 | 第14-16页 |
材料和方法 | 第16-24页 |
1 试验材料 | 第16页 |
2 仪器设备和试剂 | 第16-17页 |
3 方法 | 第17-24页 |
结果与分析 | 第24-53页 |
1 含PHA基因的基因组DNA片段的测序及序列分析 | 第24-44页 |
1.1 测序 | 第24页 |
1.2 测序的质量分析 | 第24页 |
1.3 开放阅读框ORF抽提 | 第24-29页 |
1.3.1 开放阅读框的抽提 | 第24-28页 |
1.3.2 开放阅读框的蛋白质序列 | 第28-29页 |
1.4 开放阅读框ORF的同源性及序列比对分析 | 第29-42页 |
1.4.1 ORF1的同源性及序列比对分析 | 第30-33页 |
1.4.2 ORF2的同源性及序列比对分析 | 第33-36页 |
1.4.3 ORF3的同源性及序列比对分析 | 第36-39页 |
1.4.4 ORF4的同源性分析 | 第39页 |
1.4.5 ORF5的同源性分析 | 第39-42页 |
1.5 转录启动子区的预测 | 第42-44页 |
2 phaA、phaB和phaC基因的分离 | 第44-51页 |
2.1 phaA、phaB和phaC的PCR扩增 | 第44-49页 |
2.1.1 Pseudomanas sp.基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
2.1.2 phaA的引物设计及PCR扩增 | 第45-46页 |
2.1.3 phaB的引物设计及PCR扩增 | 第46-47页 |
2.1.4 phaC的引物设计及PCR扩增反应 | 第47-49页 |
2.2 phaA、phaB和phaC的纯化及其与pGEM-T载体的连接 | 第49-51页 |
2.2.1 扩增片段纯化 | 第49页 |
2.2.2 PCR扩增片段与pGEM-T载体连接 | 第49页 |
2.2.3 改良法提取质粒DNA | 第49-50页 |
2.2.4 重组子外源片段的酶切验证 | 第50-51页 |
3 植物种子特异性表达载体pBI121-7S构建 | 第51-53页 |
3.1 7S片段与无启动子的pBI121片段的分离纯化 | 第51页 |
3.2 7S片段与无启动子的pBI121片段连接、转化与酶切筛选 | 第51-53页 |
讨论 | 第53-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67-68页 |
附录 | 第68-82页 |