| 综述 | 第1-21页 |
| 1 历史与现状 | 第7-8页 |
| 2 胚胎干细胞的生物学特性 | 第8-9页 |
| 2．1 ES细胞全能性和多能性 | 第8页 |
| 2．2 ES细胞形态特征 | 第8-9页 |
| 2．3 ES细胞可操作性 | 第9页 |
| 2．4 ES细胞具有种系传递功能 | 第9页 |
| 2．5 ES细胞的体外增殖 | 第9页 |
| 3 哺乳动物胚胎干细胞建系方法 | 第9-10页 |
| 3．1 囊胚法 | 第9页 |
| 3．2 胎儿原始生殖细胞（PGCs）法 | 第9-10页 |
| 3．3 核移植细胞法 | 第10页 |
| 4 ES细胞分离的影响因素 | 第10-13页 |
| 4．1 饲养层细胞的影响 | 第10-11页 |
| 4．2 生长因子的影响 | 第11页 |
| 4．3 培养基对ES细胞的影响 | 第11-12页 |
| 4．4 胚龄对ES细胞分离和克隆的影响 | 第12页 |
| 4．5 遗传背景的影响 | 第12-13页 |
| 5 ES细胞发育的基因调控 | 第13-14页 |
| 5．1 内源性调控 | 第13页 |
| 5．2 基因转录因子对干细胞的调节 | 第13页 |
| 5．3 端粒体（telomere）的长度和干细胞的增殖和分化有重要关系 | 第13页 |
| 5．4 外源性调控 | 第13页 |
| 5．5 分泌因子 | 第13-14页 |
| 5．6 膜蛋白介导的细胞间的相互作用 | 第14页 |
| 5．7 细胞外基质对干细胞的调控 | 第14页 |
| 6 胚胎干细胞的分化和定向分化 | 第14-16页 |
| 7 ES细胞的鉴定 | 第16-18页 |
| 7．1 形态学特征 | 第16页 |
| 7．2 碱性磷酸酶（AKP）活性的检测 | 第16页 |
| 7．3 胚胎的阶段特异性细胞表面抗原（SSEA-1） | 第16-17页 |
| 7．4 Oct-4活性 | 第17页 |
| 7．5 端粒酶 | 第17页 |
| 7．6 体内体外分化 | 第17页 |
| 7．7 嵌合体 | 第17-18页 |
| 7．8 核移植 | 第18页 |
| 8 ES细胞的扩增、培养、冻存及解冻 | 第18页 |
| 9 胚胎干细胞的应用前景 | 第18-21页 |
| 9．1 生产克隆动物 | 第18-19页 |
| 9．2 生产转基因动物 | 第19页 |
| 9．3 研究真核基因的表达和调控 | 第19页 |
| 9．4 细胞、组织和器官的修复和移植治疗 | 第19-20页 |
| 9．5 发育生物学研究的理想体外模型 | 第20页 |
| 9．6 高效新型药的发现，筛选动物和人类疾病的模型 | 第20-21页 |
| 山羊类胚胎干细胞的分离、克隆 | 第21-30页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 1 材料 | 第23-24页 |
| 1．1 试验动物 | 第23页 |
| 1．2 主要仪器和药品 | 第23-24页 |
| 1．2．1 主要仪器 | 第23页 |
| 1．2．2 主要药品 | 第23-24页 |
| 1．2．3 英文缩写与中文对照 | 第24页 |
| 1．3 试剂和溶液的配制 | 第24页 |
| 1．3．1 DMEM培养液 | 第24页 |
| 1．3．2 无Ca2+、Mg2+PBS缓冲液 | 第24页 |
| 1．3．3 冲胚液 | 第24页 |
| 1．3．4 丝裂霉素C液 | 第24页 |
| 1．3．5 细胞消化液胰酶EDTA | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-30页 |
| 2．1 从早期胚胎中分离、克隆山羊的胚胎干细胞 | 第24-27页 |
| 2．1．1 山羊胎儿成纤维细胞饲养层的制备 | 第24-25页 |
| 2．1．2 小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的制备 | 第25-26页 |
| 2．1．3 山羊胚胎的获取和培养 | 第26-27页 |
| 2．1．4 内细胞团的增殖和离散 | 第27页 |
| 2．1．5 胚胎干细胞的分离和传代 | 第27页 |
| 2．1．6 碱性磷酸酶（AKP）染色 | 第27页 |
| 2．1．7 类ES细胞体外分化试验 | 第27页 |
| 2．2 从原始生殖细胞分离和克隆山羊的胚胎干细胞 | 第27-30页 |
| 2．2．1 PGCs的分离与原代培养 | 第27-28页 |
| 2．2．2 PGCs的传代 | 第28页 |
| 2．2．3 碱性磷酸酶（AKP）染色 | 第28-29页 |
| 2．2．4 体外分化试验 | 第29-30页 |
| 实验内容 | 第30-36页 |
| 1 从早期胚胎中分离与克隆山羊胚胎干细胞的试验结果 | 第30-34页 |
| 1．1 山羊胚胎的形态特征 | 第30页 |
| 1．2 囊胚的贴壁与ICM的增殖 | 第30-31页 |
| 1．2．1 山羊囊胚在培养液中的生长行为 | 第30页 |
| 1．2．2 山羊囊胚的贴壁与ICM的增殖 | 第30-31页 |
| 1．3 内细胞团的离散和传代表现 | 第31-32页 |
| 1．3．1 小鼠内细胞团的离散和传代表现 | 第31页 |
| 1．3．2 山羊内细胞团的离散和传代表现 | 第31-32页 |
| 1．4 不同条件对山羊类ES细胞分离的影响 | 第32-34页 |
| 1．4．1 胚龄对山羊类ES细胞分离的影响 | 第32页 |
| 1．4．2 饲养层 | 第32-33页 |
| 1．4．3 生长因子 | 第33-34页 |
| 1．5 AKP染色 | 第34页 |
| 1．6 山羊类ES细胞的分化 | 第34页 |
| 2 从原始生殖细胞分离和克隆山羊的胚胎干细胞的试验结果 | 第34-36页 |
| 2．1 体外培养山羊原代PGCs的生长情况 | 第34页 |
| 2．2 PGCs的传代情况 | 第34-35页 |
| 2．3 体外分化试验情况 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-40页 |
| 1 山羊和小鼠胚胎生长行为的差异 | 第36页 |
| 2 胚龄对ES细胞分离和克隆的影响 | 第36-37页 |
| 3 饲养层对ES细胞分离和克隆的影响 | 第37-38页 |
| 4 生长因子对ES细胞分离和克隆的影响 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 英文摘要 | 第47-48页 |
| 附图 | 第48-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
