| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表及中英文对照 | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-14页 |
| ·Equ c1 研究进展 | 第8-10页 |
| ·重组低变应原性过敏原与特异性免疫治疗 | 第10-12页 |
| ·密码子优化 | 第12-13页 |
| ·抗原表位预测 | 第13-14页 |
| 2 材料与试剂 | 第14-18页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·培养基及常用试剂配方 | 第16-18页 |
| 3 实验方法 | 第18-26页 |
| ·Equ c1 蛋白的密码子优化 | 第18页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·Equ c1 基因克隆载体构建 | 第19-21页 |
| ·表达载体的构建 | 第21页 |
| ·表达载体转化 Rosetta | 第21-22页 |
| ·重组载体转化步骤 | 第22页 |
| ·Equ c1 突变位点预测及载体构建 | 第22-24页 |
| ·蛋白诱导表达及表达条件的优化 | 第24-25页 |
| ·Equ c1 蛋白亲和纯化及冻干 | 第25-26页 |
| ·Western blot 鉴定目的蛋白 | 第26页 |
| 4 实验结果 | 第26-53页 |
| ·Equ c1 密码子优化结果 | 第26-27页 |
| ·Equ c1 基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·重组 Equ c1-pET-44a 克隆载体的构建 | 第29-30页 |
| ·重组 Equ c1-pET-44a 表达菌株的构建 | 第30页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白诱导表达 SDS-PAGE 鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白表达条件的优化 | 第31-33页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白纯化结果 | 第33-34页 |
| ·Western-Blot 鉴定纯化后的蛋白 | 第34页 |
| ·Equ c1 突变蛋白表位预测和突变基因的获取 | 第34-37页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 153 突变菌株的构建及表达结果 | 第37-39页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 120 突变菌株的构建及表达结果 | 第39-41页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白突变 50 菌株的构建及表达结果 | 第41-43页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 50-120 突变菌株的构建及表达结果 | 第43-45页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 50-153 突变菌株的构建及表达结果 | 第45-47页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 153-120 突变菌株的构建及表达结果 | 第47-49页 |
| ·重组 Equ c1 蛋白 153-120-50 突变菌株的构建及表达结果 | 第49-51页 |
| ·重组突变蛋白的 Western-Blot 鉴定 | 第51-52页 |
| ·蛋白三级结构模拟 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-55页 |
| 6 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-70页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
