| 英文缩略表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| 1．1 高等植物组织特异启动子研究进展 | 第9-16页 |
| 1．1．1 叶片特异表达启动子 | 第9-11页 |
| 1．1．1．1 光诱导型叶片特异表达启动子 | 第9-11页 |
| 1．1．1．2 非光诱导型叶片特异表达启动子 | 第11页 |
| 1．1．2 种子特异表达启动子 | 第11-13页 |
| 1．1．3 维管束特异表达启动子 | 第13-14页 |
| 1．1．4 果实特异表达启动子 | 第14-15页 |
| 1．1．4．1 双子叶植物果实特异表达启动子 | 第14-15页 |
| 1．1．4．2 单子叶植物植物果实特异表达启动子 | 第15页 |
| 1．1．5 块茎专一表达启动子 | 第15页 |
| 1．1．6 花特异表达启动子 | 第15-16页 |
| 1．1．6．1 花药特异表达启动子 | 第16页 |
| 1．1．6．2 花粉特异表达启动子 | 第16页 |
| 1．2 本课题的目的意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-33页 |
| 2．1 材料 | 第17-18页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第17页 |
| 2．1．2 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2．1．3 酶与生化试剂 | 第17页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第17-18页 |
| 2．2 实验方法 | 第18-33页 |
| 2．2．1 基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
| 2．2．1．1 CTAB法提取裂叶牵牛基因组总DNA | 第18页 |
| 2．2．1．2 总DNA提取产物的纯化 | 第18页 |
| 2．2．1．3 微量法提取烟草总DNA | 第18-19页 |
| 2．2．2 PNZIP基因启动子的分离 | 第19-23页 |
| 2．2．2．1 PNZIP基因启动子的PCR扩增 | 第19-20页 |
| 2．2．2．2 目的片段的克隆 | 第20页 |
| 2．2．2．3 感受态细胞制备 | 第20-21页 |
| 2．2．2．4 转化 | 第21页 |
| 2．2．2．5 碱法小量提取质粒DNA | 第21-22页 |
| 2．2．2．6 大量提取质粒DNA | 第22-23页 |
| 2．2．2．7 克隆载体质粒DNA的酶切鉴定 | 第23页 |
| 2．2．2．8 序列测定 | 第23页 |
| 2．2．3 总RNA的提取 | 第23-25页 |
| 2．2．4 转录启始位点的鉴定 | 第25页 |
| 2．2．5 亚克隆的测序 | 第25-26页 |
| 2．2．6 PNZIP基因启动子缺失片段的获得 | 第26-27页 |
| 2．2．7 植物表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2．2．8 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备、转化 | 第28页 |
| 2．2．8．1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2．2．8．2 冻融法转化农杆菌 | 第28页 |
| 2．2．9 农杆菌介导转化烟草 | 第28-30页 |
| 2．2．9．1 农杆菌的培养 | 第28-29页 |
| 2．2．9．2 烟草的转化 | 第29-30页 |
| 2．2．10 转基因烟草PCR检测 | 第30页 |
| 2．2．11 转基因烟草的GUS活性分析 | 第30-33页 |
| 2．2．11．1 GUS基因表达的组织化学检测 | 第30页 |
| 2．2．11．2 GUS基因表达的定量分析 | 第30-31页 |
| 2．2．11．3 荧光测定 | 第31-32页 |
| 2．2．11．4 酶活力计算 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-47页 |
| 3．1 PNZIP基因启动子的分离 | 第33-37页 |
| 3．1．1 PNZIP基因启动子的克隆及鉴定 | 第33-35页 |
| 3．1．2 PNZIP全长启动子序列 | 第35-37页 |
| 3．2 PNZIP启动子转录起始位点的分析 | 第37页 |
| 3．3 PNZIP启动子缺失片段的获得 | 第37-38页 |
| 3．4 植物表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 3．5 根癌农杆菌的转化 | 第41页 |
| 3．6 转基因烟草的获得及检测 | 第41-43页 |
| 3．7 转基因烟草GUS基因表达的组织化学检测 | 第43页 |
| 3．8 GUS基因表达的定量分析 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-53页 |
| 4．1 启动子的克隆方法 | 第47-48页 |
| 4．1．1 利用探针杂交法 | 第47页 |
| 4．1．2 利用PCR方法克隆启动子 | 第47-48页 |
| 4．1．2．1 反向PCR（inverse PCR）克隆启动子 | 第47页 |
| 4．1．2．2 接头PCR（adaptor PCR）克隆启动子 | 第47-48页 |
| 4．1．2．2．1 接头PCR克隆启动子的注意事项 | 第47-48页 |
| 4．2 PNZIP启动子的功能分析 | 第48-53页 |
| 4．2．1 PNZIP启动子的特征 | 第48-50页 |
| 4．2．2 PNZIP启动子可能的调控方式 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 英文摘要 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
