| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 1． 微生物细胞表面展示研究进展 | 第9-22页 |
| 1．1 微生物细胞表面展示的概念及发展 | 第9-10页 |
| 1．2 微生物细胞表面展示的应用 | 第10-13页 |
| 1．2．1 构建和筛选蛋白质文库 | 第10-11页 |
| 1．2．2 开发活菌体疫苗，生产抗血清和多克隆抗体 | 第11-12页 |
| 1．2．3 构建全细胞催化剂 | 第12页 |
| 1．2．4 开发新型微生物吸附剂 | 第12页 |
| 1．2．5 研制新型生物传感器 | 第12-13页 |
| 1．3 展示体系的多样性 | 第13-18页 |
| 1．3．1 在酵母菌中表达的展示载体 | 第13页 |
| 1．3．2 在革兰氏阳性菌中表达的展示载体 | 第13-14页 |
| 1．3．3 在革兰氏阴性菌中表达的展示载体 | 第14-18页 |
| 1．3．3．1 “三夹板”融合式（sandwich fusion） | 第15-17页 |
| 1．3．3．2 C端融合式 | 第17-18页 |
| 1．3．3．3 N端融合式 | 第18页 |
| 1．4 构建展示载体的一般原则 | 第18-20页 |
| 1．4．1 运载蛋白与乘客蛋白的匹配 | 第18-19页 |
| 1．4．2 宿主适宜 | 第19-20页 |
| 1．5 二肽蛋白及多肽蛋白的展示 | 第20-22页 |
| 2． 研究目的 | 第22-24页 |
| 3． 材料和方法 | 第24-30页 |
| 3．1 实验材料 | 第24-26页 |
| 3．1．1 菌株 | 第24页 |
| 3．1．2 质粒 | 第24页 |
| 3．1．3 聚合酶链式反应的引物 | 第24页 |
| 3．1．4 培养基 | 第24-26页 |
| 3．1．5 试剂及仪器 | 第26页 |
| 3．2 实验方法 | 第26-30页 |
| 3．2．1 菌体的培养及诱导 | 第26-27页 |
| 3．2．2 大肠杆菌染色体的提取 | 第27页 |
| 3．2．3 大肠杆菌质粒的提取 | 第27页 |
| 3．2．4 大肠杆菌受体菌的转化 | 第27页 |
| 3．2．5 DNA的电泳分析 | 第27页 |
| 3．2．6 DNA片断的回收 | 第27页 |
| 3．2．7 PCR反应 | 第27页 |
| 3．2．8 蛋白样品的制备及分析 | 第27-28页 |
| 3．2．9 重组菌株对SDS和EDTA的敏感性 | 第28页 |
| 3．2．10 Ni-NTA-琼脂糖微球吸附实验 | 第28-29页 |
| 3．2．11 镉离子吸附实验 | 第29页 |
| 3．2．12 刚果红染色法测定木聚糖酶的活力 | 第29页 |
| 3．2．13 DNS试剂法测定木聚糖酶的活力 | 第29-30页 |
| 4． 结果与分析 | 第30-60页 |
| 4．1 克隆大肠杆菌的OMPC基因 | 第30-37页 |
| 4．1．1 从大肠杆菌菌株中克隆ompC及其启动子 | 第30-31页 |
| 4．1．2 将ompC基因及其启动子克隆至pUC19，构建pSXU19 | 第31-32页 |
| 4．1．3 将ompC基因及其启动子克隆至pACYC184，构建pSXU184 | 第32-33页 |
| 4．1．4 基因ompC在pSXU19和pSXU184上的表达 | 第33-34页 |
| 4．1．5 将ompC基因克隆至pTrc99A，构建pTrcC | 第34-37页 |
| 4．1．6 大肠杆菌OmpC蛋白的结构分析 | 第37页 |
| 4．2 在大肠杆菌细胞表面展示多聚组氨酸肽（POLYHIS） | 第37-51页 |
| 4．2．1 质粒pTCdP的构建 | 第37-39页 |
| 4．2．2 构建ompC-（6His）_1融合基因 | 第39-41页 |
| 4．2．3 构建ompC-（6His）n融合基因 | 第41页 |
| 4．2．4 ompC-（6His）n融合基因在系列质粒载体pTCHP上的表达 | 第41-47页 |
| 4．2．5 Ni-NTA-琼脂糖微球吸附实验 | 第47-48页 |
| 4．2．6 重组菌株MC4100（pTCHP）对镉离子的吸附实验 | 第48-49页 |
| 4．2．7 重组菌株MC4100（pTCHP）的生理特性 | 第49-51页 |
| 4．3 OMPC-（6HIS）N融合蛋白在pKCH6和pKCH12质粒上的表达 | 第51-53页 |
| 4．3．1 质粒pKCH6和pKCH12的构建 | 第51页 |
| 4．3．2 OmpC-（6His）_6和OmpC-（6His）_（12）在MC4100（pKCH6）和MC4100（pKCH12）中的表达 | 第51-53页 |
| 4．4 OMPC-XYLANASE融合蛋白的构建与表达 | 第53-60页 |
| 4．4．1 ompC-xylanase（ompC-xyl）融合基因的构建 | 第53-54页 |
| 4．4．2 OmpC-xylanase融合蛋白的表达 | 第54-60页 |
| 5． 讨论 | 第60-64页 |
| 5．1 重组大肠杆菌菌株的外膜的稳定性 | 第60-61页 |
| 5．2 β-内酰胺酶的大量表达对其它分泌型蛋白的影响 | 第61-62页 |
| 5．3 微生物细胞表面展示技术与重金属离子的生物吸附 | 第62-64页 |
| 6． 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 缩略语表 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-84页 |
