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生长因子对恶性肿瘤细胞分化和生长的影响

摘要第1-9页
摘要(英文)第9-12页
前言第12-15页
材料和方法第15-27页
 一.细胞培养第15-18页
 二.软琼脂培养第18页
 三.~3H-胸腺嘧啶掺入试验第18页
 四.NGF的受体研究第18-21页
  1.~(125)Ⅰ-NGF的制备第18-19页
  2.~(125)Ⅰ-NGF结合试验(Scatchard分析)第19-20页
  3.NGF受体的亲和标记和化学交联第20页
  4.交联受体的免疫沉淀第20页
  5.用流式细胞仪检测萤光标记单抗特异结合的细胞膜表面NGF受体第20-21页
 五.分子杂交第21-24页
  1.RNA提取及Northern Blotting第21页
  2.细胞DNA的提取及Southern Blotting第21-22页
  3.cDNA探针的制备第22-24页
   a.Competent细菌的制备及转化第22页
   b.cDNA探针的扩增及鉴定第22-24页
   c.cDNA探针的标记第24页
  4.RNA-DNA杂交(Northern)及DNA-DAN杂交(Southern)第24页
 六.DNA Fingerprinting第24-25页
 七.逆转录病毒载体的构建及NGF受体基因重组第25页
 八.转化系的建立第25-27页
实验结果:第27-45页
 第一部分:NGF及其受体对人神经母细胞瘤系神经上皮瘤系细胞分化的影响第27-43页
  一.NGF诱导神经母细胞瘤及神经上皮瘤细胞的分化第27-37页
   1.DNA Fingerpriting第27页
   2.细胞系对NGF的反应第27-29页
   3.神经标志物mRNA在神经源性肿瘤细胞系中的表达及NGF对表达的影响第29-33页
   4.NGF受体和EGF受体mRNA在神经源性肿瘤细胞系中的表达及NGF对表达的影响第33页
   5.NGF对瘤细胞生长的影响第33-35页
   6.HGF受体研究第35-37页
    1) 细胞膜HGF受体与,~(125)Ⅰ-NGF结合试验第35页
    2) 神经母细胞瘤系及神经上皮瘤系中的HGF受体的生化特点第35-37页
   7.N-myc癌基因扩增与否的检测第37页
  二.NGF诱导分化的神经母细胞瘤细胞中癌基因表达的变化第37-39页
   1.c-myc癌基因在神经源性肿瘤细胞系中的表达及与NGF诱导分化的关系第37页
   2.N-myc在神经源性肿瘤细胞中的表达及其NGF对表达的影响第37-39页
   3.神经源性肿瘤细胞系中其它癌基因的表达及其NGF对表达的影响第39页
  三.重组NGFR基因在NGFR缺乏的神经母细胞瘤系中的表达及其NGF对转化细胞的分化作用第39-43页
   1.转化细胞系的特点和与其母系的比较第39页
   2.转化细胞系中重组HGFR的表达第39-42页
   3.NGF对转化细胞系基因表达及细胞生长分化的影响第42-43页
 第二部分:EGF对人癌细胞生长的影响第43-45页
讨论:第45-51页
 一.NGF诱导人神经母细胞瘤系和神经上皮瘤系的规律和特点第45-49页
 二.EGF对人癌细胞生长的影响第49-51页
结论第51-52页
附图第52-95页
参考文献第95-107页
文献综述及文献第107-126页
附录:已发表与论文有关的文章题录第126-128页
致谢第128页

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