致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-23页 |
·昆虫嗅觉系统的结构与功能 | 第10-15页 |
·昆虫周边嗅觉系统 | 第10-14页 |
·昆虫嗅觉感受器 | 第10-11页 |
·嗅觉相关蛋白及其功能 | 第11-14页 |
·昆虫嗅觉中枢神经系统 | 第14-15页 |
·昆虫气味受体研究进展 | 第15-19页 |
·传统气味受体及其功能 | 第15-17页 |
·Or83b 家族受体及其功能 | 第17-18页 |
·Or83b 家族受体在昆虫体内的表达 | 第18-19页 |
·昆虫G 蛋白研究进展 | 第19-22页 |
·G 蛋白的亚基组成以及G 蛋白偶联信号传导系统 | 第19-20页 |
·昆虫G 蛋白α亚基在昆虫体内的表达 | 第20-22页 |
·G 蛋白α亚基在昆虫不同组织内的表达 | 第20-21页 |
·G 蛋白α亚基在昆虫触角中的表达 | 第21-22页 |
·昆虫气味受体与G 蛋白的关系 | 第22-23页 |
2 引言 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-47页 |
·供试材料 | 第24-26页 |
·供试昆虫 | 第24页 |
·菌种及质粒 | 第24页 |
·主要试剂及工具酶 | 第24页 |
·试剂盒 | 第24页 |
·缓冲溶液 | 第24-25页 |
·SDS-PAGE 主要试剂 | 第25页 |
·Western blot 主要试剂 | 第25页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·原位杂交主要试剂 | 第26页 |
·免疫组化主要试剂 | 第26页 |
·试验方法 | 第26-47页 |
·核酸纯度和含量的测定 | 第26页 |
·不同组织总RNA 的提取 | 第26-27页 |
·反转录 | 第27页 |
·烟夜蛾基因组DNA 的提取 | 第27-28页 |
·引物和探针的设计与合成 | 第28-31页 |
·引物的设计与合成 | 第28页 |
·HassOr83b 基因探针的设计与合成 | 第28-31页 |
·PCR 扩增 | 第31-39页 |
·烟夜蛾HassOr83b cDNA 片段的扩增(内部扩增) | 第31页 |
·烟夜蛾HassOr83b cDNA 5′末端的扩增(5′RACE) | 第31-34页 |
·烟夜蛾HassOr83b cDNA 3′末端的扩增(3′RACE) | 第34-35页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因开放阅读框架(ORF)的扩增 | 第35-36页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因部分内含子序列的扩增 | 第36页 |
·烟夜蛾HassOr83b 在不同组织和发育期的表达 | 第36-37页 |
·烟夜蛾HassGαq 基因cDNA 片段的扩增(内部扩增) | 第37页 |
·烟夜蛾HassGαq 基因cDNA 5′末端的扩增 | 第37页 |
·烟夜蛾HassGαq cDNA 3′末端的扩增 | 第37-38页 |
·烟夜蛾HassGαq ORF 的扩增 | 第38页 |
·烟夜蛾HassGαq 在不同组织和发育期的表达 | 第38-39页 |
·PCR 产物的琼脂糖电泳检测 | 第39页 |
·PCR 产物的纯化 | 第39-40页 |
·克隆载体与PCR 纯化产物的连接 | 第40页 |
·感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第40-41页 |
·感受态细胞的制备 | 第40页 |
·质粒向克隆菌株的转化 | 第40-41页 |
·阳性克隆的筛选 | 第41页 |
·DNA 序列测定 | 第41页 |
·质粒DNA 提取 | 第41-42页 |
·HassGαq 基因原核表达载体构建、转化及鉴定 | 第42页 |
·原核表达载体的构建 | 第42页 |
·重组表达载体的转化与鉴定 | 第42页 |
·HassGαq 融合蛋白的原核表达 | 第42-43页 |
·HassGαq 原核表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第43-44页 |
·HassGαq 原核表达产物的Western blot 分析 | 第44页 |
·HassGαq 蛋白抗血清的制备 | 第44页 |
·HassGαq 蛋白抗血清的效价测定和特异性检测 | 第44-45页 |
·自制抗血清的效价测定 | 第44-45页 |
·抗血清的特异性检测 | 第45页 |
·雄性烟夜蛾成虫触角扫描电镜观察 | 第45页 |
·HassOr83b 在触角表达的原位杂交分析 | 第45-46页 |
·HassGαq 在触角表达的免疫组化分析 | 第46-47页 |
4 结果与分析 | 第47-63页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因完整cDNA 序列 | 第47-48页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因cDNA 片段的扩增(内部扩增)、克隆和序列测定 | 第47页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因cDNA 末端的扩增、克隆和序列测定 | 第47-48页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因完整cDNA 序列 | 第48页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因cDNA 的序列分析 | 第48-51页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因部分内含子的扩增、克隆和序列分析 | 第51-52页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因在不同组织和发育期的表达 | 第52-53页 |
·雄性烟夜蛾触角感器分布 | 第53-54页 |
·烟夜蛾HassOr83b 基因在触角内的表达 | 第54-55页 |
·烟夜蛾HassGαq 基因cDNA 序列的扩增和序列测定 | 第55页 |
·烟夜蛾HassGαq 基因cDNA 序列分析 | 第55-58页 |
·HassGαq 基因在烟夜蛾不同组织和发育期的表达 | 第58-59页 |
·烟夜蛾HassGαq 基因的原核表达 | 第59-60页 |
·烟夜蛾HassGαq 蛋白抗血清的制备、效价分析及特异性检测 | 第60-61页 |
·烟夜蛾HassGαq 蛋白抗血清的制备和效价分析 | 第60页 |
·烟夜蛾HassGαq 蛋白抗血清的特异性检测 | 第60-61页 |
·烟夜蛾HassGαq 蛋白在触角内的表达 | 第61-63页 |
5 结论与讨论 | 第63-67页 |
·结论 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
ABSTRACT | 第75-77页 |