致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-31页 |
·原生质体分离、纯化和培养 | 第14-16页 |
·原生质体在植物病毒学研究中的应用 | 第14页 |
·原生质体分离 | 第14-15页 |
·原生质体纯化与活力检测 | 第15-16页 |
·原生质体培养 | 第16页 |
·植物细胞骨架与植物病毒 | 第16-22页 |
·植物细胞骨架 | 第16-18页 |
·细胞骨架与病毒 | 第18-22页 |
·兰花病毒检测 | 第22-30页 |
·兰花起源、分布与价值 | 第22-23页 |
·兰花主要病害 | 第23-25页 |
·两种主要兰花病毒病害 | 第25-26页 |
·植物病毒检测方法 | 第26-30页 |
·研究内容及目的 | 第30-31页 |
第2章 豌豆原生质体分离、培养与细胞骨架标记 | 第31-40页 |
·材料与试剂 | 第31页 |
·毒源 | 第31页 |
·植物材料 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·常用溶液和培养基的配制 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·豌豆原生质体分离 | 第31-32页 |
·豌豆原生质体纯化 | 第32页 |
·豌豆原生质体培养 | 第32页 |
·原生质体活力检测 | 第32页 |
·原生质体微管骨架免疫荧光标记 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-38页 |
·原生质体制备 | 第33-38页 |
·微管骨架免疫荧光标记 | 第38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第3章 兰花上两种主要病毒CYMMV和ORSV的检测 | 第40-57页 |
·材料与方法 | 第40-42页 |
·病毒材料采集与保存 | 第40页 |
·抗血清 | 第40页 |
·常用缓冲液 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·结果 | 第42-54页 |
·兰花感染CymMV或ORSV后病症 | 第42页 |
·电镜负染结果 | 第42页 |
·I-ELISA、TAS-ELISA、DAS-ELISA的检测灵敏度 | 第42-46页 |
·三种ELISA方法检测灵敏度比较 | 第46-47页 |
·I-ELISA方法检测CymMV和ORSV的应用 | 第47-54页 |
·讨论 | 第54-57页 |
·三种ELISA方法检测CymMV灵敏度比较 | 第54-55页 |
·I-ELISA在各地兰花样品检测中的应用 | 第55-57页 |
第4章 应用斑点法和组织印迹法检测CYMMV | 第57-64页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·检测对象 | 第57页 |
·抗体 | 第57页 |
·常用缓冲液 | 第57页 |
·电镜负染法 | 第57页 |
·免疫斑点法(Dot-ELISA) | 第57-58页 |
·组织印迹法(Tissue blot-ELISA) | 第58页 |
·提纯病毒不同稀释度检测 | 第58页 |
·病叶粗汁液不同稀释度检测 | 第58页 |
·病叶组织不同印迹次数检测 | 第58-59页 |
·结果 | 第59-62页 |
·免疫斑点法、组织印迹法检测结果 | 第59-61页 |
·免疫斑点法、组织印迹法和电镜观察法检测结果对比 | 第61页 |
·CymMV、ORSV复合侵染病叶粗汁液梯度稀释Dot-ELISA检测结果 | 第61页 |
·组织一次平切后不同印迹次数检测结果 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录A 常用溶液及缓冲液配方 | 第71-74页 |
附录B 固定液配方 | 第74-75页 |
附录C 原生质体MS培养基 | 第75页 |