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人肝癌细胞系来源iPS细胞的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 前言第9-15页
   ·诱导多潜能干细胞第9-10页
   ·转录因子及 microRNAs第10-12页
     ·Oct4第10页
     ·Sox2第10-11页
     ·Nanog第11页
     ·Lin28第11页
     ·MicroRNAs第11-12页
   ·诱导多潜能干细胞的应用第12-13页
     ·iPS 细胞在疾病模型上的应用第12页
     ·iPS 细胞在临床上的应用前景第12-13页
   ·诱导干细胞存在的问题第13-15页
     ·重编程效率第13页
     ·安全问题第13-15页
第二章 携带干细胞特异性转录因子的慢病毒生产第15-20页
   ·试验材料第15-17页
     ·试验试剂第15页
     ·主要仪器与设备第15-16页
     ·主要试剂配制第16-17页
     ·试验方法及步骤第17-18页
     ·质粒 DNA 的少量制备与鉴定第17页
     ·与慢病毒包装相关的质粒的大量抽提第17-18页
     ·慢病毒的包装和生产第18页
     ·慢病毒的收获第18页
   ·实验结果第18-19页
   ·讨论第19页
   ·结论第19-20页
第三章 人肝癌细胞系 Huh7 的培养及慢病毒的感染第20-31页
   ·实验材料第20-22页
     ·人肝癌细胞系 Huh7 为本实验室保有第20页
     ·试验试剂第20页
     ·主要仪器与设备第20-21页
     ·主要试剂配制第21-22页
   ·试验方法及步骤第22-27页
     ·人肝癌细胞系 Huh7 的复苏与传代第22页
     ·Huh7 细胞的冻存第22-23页
     ·滋养层细胞的制备第23-25页
     ·hESC 细胞的复苏,传代及冻存第25-27页
   ·试验结果第27-28页
     ·指示质粒包装出的慢病毒预感染 Huh7 细胞第27-28页
   ·携带转录因子的慢病毒感染 Huh7 细胞第28-29页
     ·试验试剂第28页
     ·主要仪器与设备第28页
     ·主要试剂配制第28-29页
   ·试验方法及步骤第29页
     ·病毒感染 Huh7 细胞第29页
   ·试验结果第29-30页
     ·携带转录因子基因的慢病毒诱导出克隆第29-30页
   ·讨论第30页
   ·结论第30-31页
第四章 诱导多潜能干细胞的培养与鉴定第31-41页
   ·试验材料第31-32页
     ·试验试剂第31-32页
     ·主要仪器与设备第32页
     ·主要试剂配制第32页
   ·试验方法和步骤第32-37页
     ·iHuh7 细胞的传代及冻存第32-33页
     ·碱性磷酸酶染色第33页
     ·原位荧光免疫检测第33页
     ·RT-PCR 检测克隆细胞内源多潜能基因表达第33-36页
     ·体内分化畸胎瘤实验第36页
     ·免疫组化实验第36-37页
   ·实验结果第37-39页
     ·克隆细胞 AP 染色阳性第37-38页
     ·克隆细胞表达 Oct4 和 TRA-1-60第38页
     ·定量 PCR 结果第38-39页
     ·体内分化为畸胎瘤第39页
   ·讨论第39页
   ·结论第39-41页
讨论第41-43页
参考文献第43-49页
文献综述:诱导干细胞的研究进展第49-56页
 参考文献第53-56页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文第56-57页
致谢第57-58页

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