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荧光假单胞菌中转录因子PhlH调节2,4-DAPG降解机制探究

中文摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 引言第9-14页
    1.1 植物生长促生菌概述第9-10页
    1.2 假单胞菌的生防功能第10-11页
    1.3 2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)合成基因簇简介第11-13页
    1.4 2,4-DAPG合成的调控机制第13-14页
第二章 实验材料第14-19页
    2.1 实验试剂与实验仪器第14-15页
    2.2 实验试剂配制第15-19页
第三章 实验方法第19-25页
    3.1 菌株与培养条件第19页
    3.2 载体的构建,蛋白的表达与纯化第19页
    3.3 2, 4-DAPG, MAPG和PG的定量方法第19-20页
    3.4 构建荧光假单胞菌 2P24的框内缺失突变体第20页
    3.5 构建LacZ报告基因载体及β-半乳糖苷酶活性检测第20-21页
    3.6 凝胶阻滞实验(EMSA)第21页
    3.7 DNase Ⅰ足迹法实验第21页
    3.8 PhlH蛋白的戊二醛化学交联实验第21-22页
    3.9 用差示扫描荧光测定法筛选小分子第22页
    3.10 荧光猝灭实验第22页
    3.11 质粒的点突变第22-23页
    3.12 总RNA的提取,cDNA的制备及荧光定量PCR第23-25页
第四章 实验结果第25-55页
    4.1 TetR家族转录因子PhlH可以结合PhlG基因的上游序列第25-29页
    4.2 PhlH特异性结合一个DNA回文序列第29-33页
    4.3 在体内PhlH抑制PhlG基因的表达第33-37页
    4.4 2,4-DAPG与MAPG为PhlH的天然配体第37-39页
    4.5 2,4-DAPG解除了PhlH介导的对PhlG表达的抑制作用第39-46页
    4.6 PhlH通过PhlG对 2,4-DAPG的合成造成影响第46-48页
    4.7 PhlH和PhlF在细菌生长时有着不同的表达模式第48-49页
    4.8 PhlG介导的 2,4-DAPG降解赋予荧光假单胞菌 2P24在碳源/氮源缺乏条件下的生长优势第49-55页
第五章 结论与展望第55-61页
参考文献第61-67页
在学期间的研究成果第67-68页
致谢第68页

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