摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
引言 | 第8-12页 |
第一章 材料和方法 | 第12-33页 |
·材料 | 第12-13页 |
·主要仪器设备 | 第12页 |
·质粒、菌株与细胞株 | 第12页 |
·主要实验试剂及配制方法 | 第12-13页 |
·方法 | 第13-33页 |
·目的基因的选择及引物设计 | 第13-16页 |
·目的基因的获得及纯化 | 第16-18页 |
·克隆载体构建及鉴定 | 第18-22页 |
·真核表达质粒的构建 | 第22-25页 |
·细胞转染及稳定转染细胞系的建立 | 第25-27页 |
·稳定转染细胞阳性克隆的筛选 | 第27-31页 |
·突变CD59分子抗补体活性检测 | 第31-33页 |
第二章 结果 | 第33-52页 |
·突变CD59基因的克隆与鉴定 | 第33-34页 |
·克隆载体的构建与鉴定 | 第34-35页 |
·重组表达载体构建与鉴定 | 第35-38页 |
·正常中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的培养 | 第38-39页 |
·重组基因转染CHO细胞的筛选 | 第39-41页 |
·阳性重组克隆在CHO细胞的表达 | 第41-46页 |
·荧光免疫结果 | 第41-42页 |
·CD59寡核苷酸探针原位杂交鉴定阳性细胞克隆 | 第42-43页 |
·SDS—PAGE检测结果 | 第43-44页 |
·免疫印迹技术(Western-blot法)鉴定突变CD59分子的表达 | 第44-45页 |
·固相酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CD59分子的表达 | 第45-46页 |
·突变人CD59生物学活性的检测结果 | 第46-52页 |
·台盼蓝染色试验结果 | 第46-50页 |
·染料释放试验结果 | 第50-52页 |
第三章 讨论 | 第52-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
综述 | 第61-89页 |
综述的参考文献 | 第81-89页 |
博士研究生期间第一作者发表的文章 | 第89-90页 |
附录 | 第90-101页 |
致谢 | 第101-102页 |