英文缩略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
1 前言 | 第13-17页 |
2 材料与方法 | 第17-23页 |
·主要材料和试剂 | 第17页 |
·Fas 基因真核表达载体的构建与鉴定 | 第17-20页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第17页 |
·Fas 基因总RNA 提取及RT-PCR | 第17-18页 |
·Fas 基因的扩增及鉴定 | 第18页 |
·克隆载体PMD18-T-Fas 构建及鉴定 | 第18-19页 |
·Fas 基因真核表达载体的构建与鉴定 | 第19-20页 |
·pBK-Fas 转染舌鳞癌 Tca8113 细胞 | 第20页 |
·肿瘤细胞培养 | 第20页 |
·基因转染与阳性克隆筛选 | 第20页 |
·RT-PCR 检测 Fas mRNA 表达及半定量分析 | 第20-21页 |
·RT-PCR 引物设计 | 第20-21页 |
·细胞总RNA 提取 | 第21页 |
·RT-PCR 检测Fas mRNA 表达 | 第21页 |
·RT-PCR 产物的半定量分析 | 第21页 |
·琼脂糖凝胶电泳对 Fas 转染细胞凋亡的检测 | 第21页 |
·Fas 蛋白表达的流式细胞仪检测 | 第21-22页 |
·Fas 基因的体外抑瘤效应 | 第22-23页 |
·细胞生长曲线描记(计数法) | 第22页 |
·MTT 法检测细胞增殖抑制率 | 第22-23页 |
·软琼脂集落形成实验 | 第23页 |
·统计学处理 | 第23页 |
3 结果 | 第23-28页 |
·Fas 基因总 RNA 提取及 RT-PCR 结果分析 | 第23页 |
·Fas 基因 cDNA 片段长度的鉴定 | 第23-24页 |
·克隆载体 PMD18-T-Fas 重组质粒的鉴定 | 第24页 |
·Fas 基因真核表达载体 pBK-Fas 的双酶切鉴定 | 第24页 |
·真核表达重组质粒 pBK-Fas 的测序鉴定 | 第24-25页 |
·Fas mRNA 的表达及 RT-PCR 产物的半定量分析 | 第25页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 Fas 转染细胞凋亡 | 第25页 |
·Fas 蛋白表达的检测 | 第25-26页 |
·Fas 基因转染舌鳞癌 Tca8113 细胞的体外抑瘤效应 | 第26-28页 |
·细胞生长曲线的描记 | 第26-27页 |
·MTT 法检测细胞增殖抑制率 | 第27-28页 |
·软琼脂细胞集落形成结果 | 第28页 |
4 讨论 | 第28-39页 |
·真核表达质粒 pBK-Fas 成功构建的意义 | 第32-34页 |
·Fas 基因cDNA 结果分析 | 第33页 |
·真核表达质粒pBK-Fas 构建与鉴定的分析 | 第33-34页 |
·Fas mRNA 的表达及 RT-PCR 产物的半定量分析 | 第34-35页 |
·DNA ladder 检测 Fas 转染细胞凋亡 | 第35页 |
·Fas 蛋白表达的意义 | 第35-36页 |
·Fas 基因转染舌鳞癌 Tca8113 细胞的体外抑瘤效应的分析 | 第36-38页 |
·体外培养的Tca8113 细胞的生长活力检测 | 第36-37页 |
·Fas 基因转染舌鳞癌Tca8113 细胞增殖抑制率的分析 | 第37页 |
·软琼脂Tca8113 细胞克隆形成结果分析 | 第37-38页 |
·pBK-Fas 转染舌鳞癌 Tca8113 细胞的凋亡诱导以及舌鳞癌基因治疗的展望 | 第38-39页 |
5 结论 | 第39-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附录 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
综述 | 第48-56页 |
附图 | 第56-60页 |